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时间:2018-11-11
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1、三氧化二砷对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响【关键词】三氧化二砷 TheInfluenceofArsenicTrioxideontheGroeraseActivityofHumanLargeIntestineCarcinomaCells Abstract:ObjectiveTostudytheinfluenceofarsenictrioxideonthegroeraseactivityofhumanlargeintestinecarcinomacelllines.MethodsTheinfluenceofgroanlargeintestinecarcinomacelll
2、inesLoVoandCoLo320inducedbyAs2O3injectionethod,Trypanbluemethod,3(4,5dimethylthiazole2yl)2,5diphenyltetrazoliumbromide(MTT)assay.Telomeraseactivityofthecarcinomacellseasuredbythemethodofrepeatampliticationprotocol(TRAP)biningidegelelectrophosis(PAGE)silverstainingmethodbeforeandaftert
3、hetreatmentanlargeintestinecarcinomacelllinesLoVoandCoLo320.AlsothetolemeraseactivityofLoVoandCoLo320treatedbyAs2O3injectionedependentrelationship.ConclusionAs2O3hassignificantinhibitioneffectonthehumanlargeintestinecarcinomacelllines,aybecloselyrelatedtoAs2O3'sinhibitingeffectonthecarcin
4、omacelltolemeraseactivity. Keya;CellLines;ArsenicTrioxide;Tolemerase 摘要:目的探讨三氧化二砷(As2O3)注射液对人类大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响。方法采用活细胞观察法、台盘兰拒染法和四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法,严密观察As2O3注射液对人大肠癌细胞株LoVo和CoLo320生长的影响;应用端粒重复序列扩增法(TRAP)—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染法检测As2O3注射液处理前、后大肠癌细胞端粒酶活性的变化。结果As2O3注射液能够显著地抑制LoVo和CoLo320细胞株的生长,并对癌
5、细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用,该作用呈现出一定的浓度和时间依赖性。结论As2O3注射液的确对于人大肠癌细胞株的生长具有显著的抑制作用,该作用可能与As2O3注射液能够抑制癌细胞的端粒酶活性密切相关。 关键词:大肠癌;三氧化二砷;细胞株;端粒酶 0引言 三氧化二砷(As2O3)是剧毒中药砒霜的有效成分,自20世纪70年代以来,我国学者率先研制成功As2O3注射液,用于治疗急性早幼粒细胞白血病(APL),取得了世人瞩目的突破进展[15]。近年来,应用As2O3注射液治疗多种实体瘤的实验和临床研究方兴未艾,受到了广泛重视[68]。2004年11月经国家食品药品监督管理
6、局(SFDA)批准增加了As2O3注射液可用于治疗晚期原发性肝癌,从而显示出更为广阔的应用前景。为了积极拓展As2O3注射液治疗其他消化道肿瘤的适应证,我们课题组业已开展该药在体内、外抗大肠癌作用的一系列实验研究,初步结果十分令人鼓舞[9,10]。本实验以两株离体人大肠癌细胞LoVo和CoLo320为研究对象,严密观察了As2O3注射液体外对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响,现报告如下: 1材料和方法 1.1细胞株 人大肠癌细胞株LoVo和CoLo320,均引自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。 1.2主要试剂 1g/LAs2O3溶液,即亚砷酸注射液(哈尔滨
7、伊达药业公司产品,批号20001102)。四甲基偶氮唑蓝(MTT),购自Fluka公司。银染TRAP试剂自配。Ts引物序列为5’AATCCGTCGAGCAGAGTT3’,Cx引物序列为5’CCCTTACCCTTACCCTTACCCTAA3’,均由中科院上海细胞生物研究所合成。CHAPS购于Sigma公司,TaqDNA多聚酶购于Promega公司。聚丙烯酰胺为EMERCK公司产品。 1.3细胞培养 将LoVo和CoLo320细胞株接种于无菌培养瓶中,加入含小牛血清、青链霉素的培养液,
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