白茅根多糖超声提取的优化

《白茅根多糖超声提取的优化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、白茅根多糖超声提取的优化【摘要】目的确定白茅根多糖最佳超声提取条件，提取白茅根多糖，为白茅根的研究、开发利用提供理论依据。方法以白茅根多糖含量为考察指标，用苯酚-硫酸法进行含量测定，利用正交实验法确定白茅根多糖的最佳超声提取条件。结果提取次数和料液比对白茅根多糖提取率的影响起主要作用。超声提取的最佳工艺为：提取温度80℃，用20倍量的水，超声提取3h，提取3次，白茅根多糖得率为6.33%。结论确定了白茅根多糖的最佳超声提取工艺。【关键词】白茅根白茅根多糖正交实验超声提取苯酚-硫酸法白茅根始载于《神农本草经》，原名茅根，为禾本科植物白茅Imperatacylindric

2、al(L.)P.Beauvvar.majorC.E.Hubb.的根茎［1］,味甘，性寒，具有凉血止血、清热利尿之功。用于治疗吐血、淋病、小便不利、水肿和黄疸等。研究表明，有效成分三萜类化合物和糖类占其总化学成分的18.8%［2］。Eglinton和Natory小组对其成分做了大量研究，先后分离出了芦竹素、白茅素、羊齿烯醇以及其他三萜类化合物。白茅根水溶液粗提取物利用凝胶过滤及负离子交换色谱法分离出一系列高分子量的多糖物质，其分子量大于15×104Da。利用化学分析法确定这些多糖中存在6种单糖苷，分别为葡萄糖苷、半乳糖苷、树胶醛糖苷、甘露糖苷、木糖苷、鼠李糖苷。为充分发

3、挥药用功效，本研究以白茅根多糖含量为检测指标，用苯酚-硫酸法进行含量测定，考察料液比(g/ml)、提取温度(℃)、超声时间(h)、提取次数等因素，探讨确定超声提取条件下提取多糖的最佳工艺条件。　　1仪器与试剂Spectrum54型紫外-可见分光光度计（上海棱光技术有限公司）；KQ-250DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；葡萄糖标准品（上海市国药集团化学试剂有限公司），白茅根（济宁邦尔中药饮片有限公司）经鉴定为禾本科植物白茅Imperatacylindrical(L.)P.Beauvvar.majorC.E.Hubb.的根茎。　　2方法与结果　　2.1白

4、茅根多糖的优化提取　　2.1.1标准葡萄糖溶液的配制精密称取干燥恒重的葡萄糖标准品25.2mg，加适量水溶解，转移到250ml容量瓶中，加水至刻度，配成浓度为100.8μg/ml标准葡萄糖溶液备用。　　2.1.25％苯酚试剂的配制取苯酚100g，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05g，蒸馏。收集182℃蒸份，称取7.5g，加水150ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。　　2.1.3标准曲线的绘制精密量取葡萄糖标准溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7ml置于干燥试管中，分别加水使成1.0ml。再分别加入5％苯酚溶液1.6ml，摇匀，然后加浓硫酸7.0ml，

5、充分摇匀，室温放置25min，在490nm处测定其最大吸收度，同时做一空白。以吸收度（A）为纵坐标，溶液的浓度（μg/ml）为横坐标，得回归方程为：A=0.0077C-0.0452，相关系数r=0.99975,可见葡萄糖的浓度在10.08～70.56（μg/ml）范围内，溶液的吸收度（A）与浓度（μg/ml）呈良好的线性关系。　　2.1.4正交实验设计白茅根主要有效成分一系列高分子量的多糖物质易溶于水，难溶于有机溶剂。因此，参照超声提取多糖的相关浓缩：合并每次实验的提取液，减压浓缩至150ml，加少量活性炭脱色，过滤。醇沉：滤液加5倍量95%乙醇，放置过滤，离心，去除

6、上清液，离心下面的絮状物，在4000r/min下，离心15min。洗涤：沉淀用水100ml溶解重复用乙醇沉淀1次，沉淀用乙醇、丙酮多次洗涤。.L.编辑。干燥：在4000r/min下，离心15min后，取沉淀物放在电热恒温干燥箱内60℃下烘干，即得白茅根多糖。　　2.1.6样品液的配制与测定将白茅根多糖于研钵中研成粉末后，分别置于500ml的容量瓶中，再从中精密吸取10.0ml，放入100ml的容量瓶中作为多糖储备液。精确量取多糖储备液1.0ml，按测定标准曲线同样的方法测其吸收度，代入回归方程，结果见表2。表2正交实验结果L9(略)由表3正交实验的结果显示，影响白茅根

7、多糖提取率的因素主次顺序为：提取次数（D）>料液比（A）>超声时间（C）>超声温度（B）。因此，白茅根多糖超声提取的最佳工艺组合为：A2B3C3D3。表3方差分析（略）由正交实验的方差分析（见表3）结果显示：提取次数和料液比的差异显著对白茅根多糖提取率的影响起最主要作用，超声时间和超声温度在此实验范围内没有显著差异，对测定结果的影响较小，与直观分析结果（见表2）相吻合。　　2.1.7验证实验取白茅根（a）50g，加水1000ml浸泡过夜后，在80℃下超声提取3次，3h/次。合并3次提取液，加少量的活性炭脱色，减压浓缩至150ml，加