哮喘豚鼠肺组织eotaxin基因表达与嗜酸粒细胞

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1、哮喘豚鼠肺组织Eotaxin基因表达与嗜酸粒细胞【关键词】哮喘关键词:哮喘;嗜酸粒细胞;嗜酸粒细胞趋化因子;嗜酸粒细胞阳离子蛋白摘要:目的探讨哮喘发病中嗜酸粒细胞趋化因子（Eotax-in）基因表达与嗜酸粒细胞（Eos）活化的关系及糖皮质激素的作用.方法将豚鼠30只随机分为哮喘组、地塞米松治疗组及正常对照组.卵蛋白致敏及诱发哮喘;制备豚鼠肺组织病理标本，HE染色;免疫组织化学技术观察Eos阳离子蛋白（ECP）在哮喘气道粘膜中的表达;原位分子杂交方法观察肺组织中EotaxinmRNA的表达;将二者行相关性分析.结果与地塞米松治疗组、正常对照组相比较，哮喘组豚鼠肺组织中ECP细胞（17

2、2±44）・mm-2与eotaxinmRNA（196±57）・mm-2表达明显增强（P<0.001），Eos活化增多;且二者呈正相关性（r=0.7447，P=0.0135）;糖皮质激素对EotaxinmRNA（20±14）・mm-2，ECP（26±19）・mm-2表达有显著的抑制作用.结论哮喘豚鼠肺组织中Eotaxin表达增强，Eos活化增多.糖皮质激素能抑制Eotaxin表达及Eos活化.　　Keya;eosinophil;eotaxin;eosinophilcationprotein　　Abstract:AIMTos

3、tudytherelationshipbetaticguineapigs，andtostudytheessentialfunctionofcorticosteroidinthem.METHODSThirtyguineapigsa，dexamethasone，nomalcontrol）.Ovalbumin（Ova）sensitizedandchallengedguineapigsodelofasthma.Thepathologicsam-plesoflungtissueaticairucosamuno-histochemistry（IHC），andtheexpressionofeot

4、axinmRNAinguinealungtissueethasoneandnormalcontrolgroups，ECPcells（172±44）・mm-2andeotaxinmRNA（196±57）・mm-2aticguineapig，andtheactivatedeosinophilsincreased（P<0.001）.TheexpressionofeotaxinmRNApositivelycorrelatedinentlyinhibitedtheexpressionofeotaxinmRNA（20±14）・mm-2andECP

5、（26±19）・mm-2.CONCLUSIONTheexpressionofeotax-ingeneandtheactivatedeosinophilsincreasedinlungtissueofasthmaticguineapigs，i-nentlydoa公司;ECPmAbEG2:Pharmacia公司;SABC免疫组化试剂盒:武汉Boster公司;Eotaxin寡核苷酸探针序列:5′CAGTCGCTGAAAGGAGATCTTCTTATTGGTCACACGAAAGCAGCAGGCAC3′，根据Genebank中登录的Eotaxin（AccessionU18941）

6、，由Oligo5软件设计，大连TaKaRa公司合成并在5′末端用地高辛标记;敏感性加强型原位杂交检测试剂盒II:武汉Boster公司;图像分析仪:PhotodetecterARGUS50型，滨松Pho-tonix公司.　　1.2方法　　1.2.1建立哮喘动物模型将哮喘组、DXM治疗组豚鼠腹腔内均注入100g・L-1Ova1mL，致敏，制备豚鼠哮喘动物模型，对照组腹腔内注入等量生理盐水.哮喘组致敏后14d，吸入雾化的10g・L-1Ova诱喘，1次・d-1，连续5d.DXM治疗组每次诱发前2h腹腔内注入地塞米松0.5mg・kg-1

7、，余同哮喘组.对照组豚鼠每日给予生理盐水雾化吸入1次，吸入时间为同批哮喘组诱喘的最长时间.实验豚鼠给予3.5mL・kg-1水合氯醛腹腔麻醉后，剖开胸腔，切开左心房，将穿刺针刺入右心室及肺动脉干，固定后快速滴入4℃生理盐水100mL冲洗干净血液，取40g・L-1多聚甲醛500mL，快速滴注100mL，剩余液体缓慢滴注至肺组织完全变白为止.取出肺组织，用灭菌手术刀将肺组织按与气道横断面垂直方向修剪成1～2mm厚度的组织片，放置于4℃的40g&#