哮喘豚鼠肺组织eotaxin基因表达与嗜酸粒细胞活化相关论文

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1、哮喘豚鼠肺组织Eotaxin基因表达与嗜酸粒细胞活化相关论文.freelRNA的表达;将二者行相关性分析.结果与地塞米松治疗组、正常对照组相比较，哮喘组豚鼠肺组织中ECP细胞（172±44）mm-2与eotaxinmRNA（196±57）mm-2表达明显增强（P0.001），Eos活化增多;且二者呈正相关性（r=0.7447，P=0.0135）;糖皮质激素对EotaxinmRNA（20±14）mm-2，ECP（26±19）mm-2表达有显著的抑制作用.结论哮喘豚鼠肺组织中Eotaxin表达增强，Eos活化增多.糖皮质激

2、素能抑制Eotaxin表达及Eos活化.Keya;eosinophil;eotaxin;eosinophilcationproteinAbstract:AIMTostudytherelationshipbetaticguineapigs，andtostudytheessentialfunctionofcorticosteroidinthem.METHODSThirtyguineapigsa.freelethasone，nomalcontrol）.Ovalbumin（Ova）sensitizedandchallenged

3、guineapigsodelofasthma.Thepathologicsam-plesoflungtissueaticairucosamuno-histochemistry（IHC），andtheexpressionofeotaxinmRNAinguinealungtissueethasoneandnormalcontrolgroups，ECPcells（172±44）mm-2andeotaxinmRNA（196±57）mm-2aticguineapig，andtheactivatedeosinophilsincre

4、ased（P0.001）.TheexpressionofeotaxinmRNApositivelycorrelatedinentlyinhibitedtheexpressionofeotaxinmRNA（20±14）mm-2andECP（26±19）mm-2.CONCLUSIONTheexpressionofeotax-ingeneandtheactivatedeosinophilsincreasedinlungtissueofasthmaticguineapigs，i-nentlydoa公司;ECPmAbEG2:Ph

5、armacia公司;SABC免疫组化试剂盒:武汉Boster公司;Eotaxin寡核苷酸探针序列:5′CAGTCGCTGAAAGGAGATCTTCTTATTGGTCACACGAAAGCAGCAGGCAC3′，根据Genebank中登录的Eotaxin（AccessionU18941），由Oligo5软件设计，大连TaKaRa公司合成并在5′末端用地高辛标记;敏感性加强型原位杂交检测试剂盒II:武汉Boster公司;图像分析仪:PhotodetecterARGUS50型，滨松Pho-tonix公司.1.2方法1.2.1建

6、立哮喘动物模型将哮喘组、DXM治疗组豚鼠腹腔内均注入100gL-1Ova1mL，致敏，制备豚鼠哮喘动物模型，对照组腹腔内注入等量生理盐水.哮喘组致敏后14d，吸入雾化的10gL-1Ova诱喘，1次d-1，连续5d.DXM治疗组每次诱发前2h腹腔内注入地塞米松0.5mgkg-1，余同哮喘组.对照组豚鼠每日给予生理盐水雾化吸入1次，吸入时间为同批哮喘组诱喘的最长时间.实验豚鼠给予3.5mLkg-1水合氯醛腹腔麻醉后，剖开胸腔，切开左心房，将穿刺针刺入右心室及肺动脉干，固定后快速滴入4℃生理盐水100mL冲洗干净血液，取40

7、gL-1多聚甲醛500mL，快速滴注100mL，剩余液体缓慢滴注至肺组织完全变白为止.取出肺组织，用灭菌手术刀将肺组织按与气道横断面垂直方向修剪成1～2mm厚度的组织片，放置于4℃的40gL-1多聚甲醛中继续固定12～24h后，进行脱水、透明、包埋、切片及HE染色.1.2.2检测ECP阳性表达免疫组织化学参照武汉Boster公司SABC免疫组化试剂盒说明书.切片脱蜡至水，以30mLL-1H2O2，室温处理5～10min，双蒸水洗3次×2min，滴加复合消化液5～10min，双蒸水洗3次×2min，滴加正常血清封闭液，室

8、温处理5～10min，甩去多余液体，不洗，滴加1∶200小鼠抗EG，24℃24h，阴性对照以PBS替代mAb，0.01molL-1PBS洗2min×3次，滴加生物素化山羊抗小鼠/兔IgG，20～37℃20/30min，0.01molL-1PBS洗2min×3次，滴加试剂SABC，20～37℃20/30min，0.01molL-1P