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时间:2018-11-10
《海南黎族人群血管紧张素转换酶2基因多态性与高血压的关系》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、海南黎族人群血管紧张素转换酶2基因多态性与高血压的关系作者:张勇吴恳金水晶周代锋张云霞陈少华李林江王镇习隽丽陈照清【摘要】目的探讨海南黎族人群血管紧张素转换酶2(ACE2)基因多态性与高血压之间的关系。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测高血压组与对照组之间的ACE2基因G8790A多态性,并推测ACE2基因多态性与高血压的发病关系。结果高血压组与对照组比较,男性高血压组有显著性差异(P<0.05),女性在基因表型及基因频率上组间比较均无统计学意义(P>0.05)。结论ACE2基因G8790A多态性位点与海南黎族男性人群高血压的发生有一定的关系。【关
2、键词】原发性高血压;血管紧张素转换酶2;基因多态性有研究表明,人类血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与高血压的发生相关〔1,2〕。2000年由Donoghue等〔3〕和Tipnis等〔4〕发现,ACE2的发生与ACE相反的生理活性作用,使人们对肾素血管紧张素醛固酮(RASS)系统有了新的认识。ACE2的基因多态性与心血管疾病相关性的研究已成为一个新的热点。国内外少见ACE2基因多态性与高血压关系的报道,本研究主要研究黎族人群ACE2基因多态性与高血压的关系。 1对象与方法 1.1研究对象所有入选者均为2007年3月至2009年8月海南陵水、昌江县医院住院及门诊的
3、黎族患者。其中,高血压组80例,男43例,女37例,年龄43~72岁,平均(56±17.2)岁,符合1999年10月《中国高血压防治指南》中I、Ⅱ期高血压的诊断标准。对照组76例,男41例,女35例,年龄42~68岁,平均(58.9±10.1)岁。所有研究对象均检测血压、身高和体重。筛选标准:均为海南黎族居民,排除继发性高血压、严重肝肾功能不全患者。组间年龄、体重指数、甘油三酯水平无显著差异(P>0.05)。 1.2方法 1.2.1血样采集①取空腹静脉血10ml提取血浆和血清,在全自动生化分析仪(AUT0LAB18,北京中科富邦医疗设备有限公司)检测肝功能、肾
4、功能、血脂、血糖;②余血5ml加入2%乙二胺四乙酸(EDTA)或肝素抗凝管中,-70℃保存,待提取基因组DNA。 1.2.2基因组DNA提取采用细胞裂解和血红素/蛋白沉淀技术纯化基因组DNA。将提取好的基因组DNA置于-70℃保存备用。 1.2.3聚合酶链反应(PCR)扩增ACE2基因引物设计:上游引物P1:5′TTCTCCCTGCTCCTATACTACCG3′;下游引物P2:5′TTCATTCATGTCCTTGCCCTTA3′。PCR反应条件为Touchdoin,94℃变性30s,退火温度在起始的10个循环钟为63℃~58℃,每次递减0.5℃,反应60s,延
5、伸72℃40s,在以后的30个循环中,退火温度固定为58℃,每次反应40s,最后延伸7min终止所有反应。PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检验。PCR扩增的目的片段经树脂(TMBigDye末端标记试剂盒(PE,FosterCity,CA),以PCR引物为测序引物进行双向测序反应。针对ACE2G8790A多态性,利用AluⅠ酶切的方法进行分型。电泳结束后取胶在凝胶成像系统中观察电泳条带并照相。对各基因型随机抽样测序核实基因型〔6~8〕。 1.2.4统计学方法应用SPSS13.0统计分析软件包进行分析。计量数据采用x±s表示。计数资料的组间比较采用t检验,率的比较采用χ2检验
6、。 2结果 2.1ACE2基因多态性PCR扩增产物中可见A基因型表现为500和210bp两个片段,G基因型表现为730bp片段,G/A杂合子表现为730、500和210bp三个片段。ACE2基因多态性与高血压无明显相关性(P>0.05)。 2.2ACE2基因多态性与高血压的关系男性中G基因频数在高血压组和对照组间差异有统计学意义(P<0.05);女性基因表型分布及基因频数组间无统计学差异(P>0.05),见表1,表2。表1黎族男性高血压患者ACE2G8790A基因分布情况表2黎族女性各组多态性基因分型及基因频率分布情况 3讨论 ACE2G879
7、0A基因多态性与高血压关系的研究中,刘同宝等〔9〕在中国汉族人中发现,ACE2基因多态性与原发性高血压出现并发症有关。Craekoerelatedcarboxypeptidase(ACE2)convertsangiotensinItoangiotensin19〔J〕.CircRes,2000;87(5):19. 4TipnisSR,HooperNM,HydeR,etal.Ahumanhomologofangiotensinconvertingenzyme.Cloningandfunctionalexpressionas
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