血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜癌中的表达及对

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1、血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜癌中的表达及对【摘要】目的检测子宫内膜癌中血管内皮生长因子(VEGF)D及其受体VEGFR3表达，探讨其在子宫内膜癌淋巴管新生中的价值。方法选择120例子宫内膜癌存档的蜡块作为观察组，60例正常增生期子宫内膜蜡块作为对照组，应用免疫组织化学技术检测VEGFD、VEGFR3及淋巴管内皮透明质酸受体(LYVE)1的表达，探讨其临床意义及在淋巴管生成中的价值。结果VEGFD、VEGFR3在子宫内膜癌中表达的阳性率明显高于对照组，LYVE1标记的淋巴管密度明显高于对照组(P<0.05)，VEGFD、VEGFR3及LMVD

2、与子宫内膜癌的浸润深度及淋巴结转移密切相关，肿瘤中VEGFD与VEGFR3、VEGFD与LMVD、VEGFR3与LMVD均呈正相关。结论子宫内膜癌中VEGFD及VEGFR3高表达，并具有协同作用，促进LYVE1阳性淋巴管生成，联合检测VEGFD、VEGFR3及LYVE1可能有助于判断子宫内膜癌的预后。【关键词】子宫内膜癌;淋巴管;VEGFD;VEGFR3;LYVE1;免疫组织化学技术　近年认为血管内皮生长因子(VEGF)D可以促进淋巴管生成，介导肿瘤的淋巴道播散。研究显示VEGFD常通过VEGF受体(VEGFR)3发挥作用〔1〕。淋巴管内皮

3、透明质酸受体1(Lymphaticvesselendothelialhyaluronicacidreceptor1，LYVE1)是近来发现的淋巴管内皮细胞及巨噬细胞表面特异性膜蛋白，为LYVE特异性受体，标记淋巴管的特异性强。本文应用免疫组织化学技术观察子宫内膜癌中VEGFD、VEGFR3及LYVE1的表达，探讨其相关性及临床意义。　　1材料与方法　　1.1临床资料我院2006年1月至2007年12月经病理确诊的子宫内膜癌术后存档蜡块，共120例，患者年龄40～78(平均58.2)岁。手术前均未进行任何治疗。收集60例确诊为增生期子宫内膜的存档蜡块作为对照组。

4、　　1.2免疫组化方法检测VEGFD、VEGFR3及LYVE1的表达VEGFD、VEGFR3及LYVE1均购自武汉博士德生物技术有限公司，应用免疫组化SP法进行检测，具体步骤：①常规脱蜡水化后，用柠檬酸缓冲液高温高压抗原修复及EDTA抗原热修复。②滴加过氧化物阻断溶液，以阻断内源性过氧化物酶的活性。③滴加非免疫性动物血清阻断非特异性反应。④滴加第一抗体，4℃过夜。⑤滴加生物素标记的第二抗体。⑥滴加链霉菌抗生物素过氧化物酶溶液。⑦滴加新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察3～10min，阳性显色为棕色，以上各步之间均用PBS浸洗3次，每次5min。⑧自来水冲洗终止

5、染色，苏木素复染，0.1%盐酸分化，PBS冲洗返蓝。切片经梯度酒精脱水干燥，中性树胶封固。　　1.3结果判定标准免疫组化染色结果：LYVE1标记的淋巴管计数参照LVD)。VEGFD和VEGFR3阳性表达于上皮细胞胞质内，为浅黄色至棕褐色颗粒，每张切片计数10个高倍视野，计算阳性细胞占总细胞数的百分率大于25%为阳性表达。　　1.4统计学方法应用SPSS统计学软件，两组间比较采用χ2检验或t检验，并进行线性相关分析。　　2结果　　2.1VEGFD、VEGFR3及LYVE1在子宫内膜癌、增生期子宫内膜组织的表达子宫内膜癌中VEGFD〔65.83%(79/120)

6、〕、VEGFR3表达阳性率〔74.17%(89/120)〕明显高于增生期子宫内膜中表达阳性率〔35.00%(21/60)、26.67%(16/60)〕，子宫内膜癌中LYVE1标记的LMVD(15.70±4.47)明显高于增生期子宫内膜(8.92±3.69)(均P<0.0001)。　　2.2VEGFD、VEGFR3及LMVD的表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系VEGFD、VEGFR3表达阳性率及LMVD在不同浸润深度及淋巴结转移差别显著(P<0.05)，见表1。表1VEGFD、VEGFR3及LMVD表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系　　2.3子宫

7、内膜癌中VEGFD、VEGFR3与LMVD表达的关系经线性相关分析，子宫内膜癌中VEGFD与VEGFR3(r=0.51,P=0.0032)、VEGFD与LMVD(r=0.47,P=0.0097)、VEGFR3与LMVD(r=0.45,P=0.0159)均呈正相关。　　3讨论　　肿瘤发生发展过程中，淋巴管生成是肿瘤发生淋巴道转移的重要基础，研究淋巴管生成的机制是研究肿瘤转移的重要途径，目前的研究多集中于淋巴管生长因子及其受体表达上，而VEGFR3被认为是淋巴管生长因子的受体〔3〕，VEGFD/VEGFR3信号传