三氧化二砷对人结肠腺癌裸鼠肝转移癌胚抗原水平的影

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1、三氧化二砷对人结肠腺癌裸鼠肝转移癌胚抗原水平的影【摘要】目的：探索应用三氧化二砷（As2O3）治疗人结肠腺癌肝转移后对荷瘤裸鼠血清、腹水及癌组织中癌胚抗原（carcinoembryonic,CEA）水平的影响。方法：在建立人结肠腺癌裸鼠肝转移模型后15min（早期治疗组）、10d（中期治疗组）、20d（晚期治疗组）经尾静脉注射As2O3（5mg/kg·d）；并以模型建立后10d经尾静脉注射生理盐水作为对照组。于接种癌细胞4周后，采集血、腹水和癌结节，分别检测其CEA含量。结果：早期治疗组的血、腹水和癌结节中的CEA含量均明显低于对照组

2、（P＜0.01）；晚期治疗组与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：早期应用As2O3能有效降低荷瘤裸鼠的血清、腹水和癌结节中CEA水平。【关键词】结肠肿瘤腺癌三氧化二砷癌胚抗原肝脏肿瘤肿瘤转移【ABSTRACT】Objective：ToinvestigatethechangeofCEAlevelsofblood,ascitesandcancertissueetastasesfromhumancolonadenocarcinomatreatedg/kg·d）in（earlytreatmentgroup）,10d（middlet

3、reatmentgroup）and20d（latetreatmentgroup）afterthemodeloflivermetastasesfromhumancolonadenocarcinomainnudemiceodeloflivermetastasesentgroupentgroupandthecontrolgroup（P＞0.05）.Conclusions：TheCEAlevelsofblood,ascitesandcancertissueinnudemiceetastasesfromhumancolonadenocarcin

4、omacouldbeloodeloflivermetastasess·Adenocarcinoma·As2O3·Carcinoembryonic·Liverneoplasms·Neoplasmmetastasis结直肠癌（colorectalcancer，CRC）是当前最常见的消化道恶性肿瘤之一。肝脏转移是影响结直肠癌根治效果的主要因素之一。由于肝脏转移癌往往是多发的，有时甚至是弥漫性的，虽有手术切除、介入治疗、化学疗法等多种方法，但一直都未能取得较满意的效果。三氧化二砷（arsenictrioxide，As2O3）系中药砒霜的主要成

5、分，近年来，许多临床研究均证实As2O3能有效治疗急性早幼粒细胞性白血病（acutepromyelocyticleukemia，APL），其完全缓解（pleteremission,CR）率可达87%［１］。本研究在建立人结肠腺癌裸鼠肝转移模型的基础上，于不同时相点应用As2O3治疗荷瘤裸鼠，观察荷瘤裸鼠的血液、腹水及癌组织中癌胚抗原（carcinoembryonic,CEA）的变化。为临床应用As2O3治疗CRC并肝转移提供实验基础。1　材料与方法1.1　细胞培养　表达CEA阳性的人结肠腺癌LS-174T细胞株由中国科学院上海细胞生物

6、研究所从美国标准菌库引进并提供，该细胞在接种裸鼠脾脏后可发生肝转移［２］。LS-174T细胞常规在RPMI1640培养液（内含10%灭活小牛血清、100U/mL青霉素、50mg/mL链霉素）中培养；置于CO2孵箱中，恒温37℃，5%CO2，饱和湿度。细胞培养密度（0.1~1.0）×106，倍增时间20~24h。每3~4天传代1次。取对数生长期细胞用0.25%胰酶（D-Hanks液配置）消化，制备成单细胞悬液，锥虫蓝染色测定细胞活力≥95%，调节细胞浓度为1×107mL-1备用。1.2　实验动物　BALB/C-nu/nu裸鼠32只（第三

7、军医大学实验动物中心提供），4~6周龄，雌雄兼用，体质量14~23g，在无致病菌（specificpathogenfree,SPF）条件下饲养。亚砷酸注射液（每支10mL，内含As2O310mg）由哈尔滨医科大学第一临床医院提供（批号：国药准字X19990191）。1.3　结肠腺癌裸鼠肝转移模型的建立　参照左国华等［３］方法进行。在超净工作台内按照无菌手术原则操作。1%戊巴比妥钠（35mg/kg）腹腔内麻醉，皮肤用75%乙醇消毒，左上腹纵行切口（长度约1.0cm），进腹后先小心结扎离断脾胃韧带，显露游离脾脏并拉至切口外。用4#针穿刺脾

8、组织（不要刺穿脾脏），缓慢（1~2min）注入LS-174T细胞悬液0.2mL（含细胞2×106个），可见注射部位脾脏被膜变白、肿胀，拔出针头后即用95%乙醇棉球压迫，以杀死可能溢出的癌细胞。轻揉5min后，切除脾脏，关