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时间:2018-11-01
《三氧化二砷对人结肠腺癌裸鼠肝转移癌胚抗原水平的影》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、三氧化二砷对人结肠腺癌裸鼠肝转移癌胚抗原水平的影【摘要】目的:探索应用三氧化二砷(As2O3)治疗人结肠腺癌肝转移后对荷瘤裸鼠血清、腹水及癌组织中癌胚抗原(carcinoembryonic,CEA)水平的影响。方法:在建立人结肠腺癌裸鼠肝转移模型后15min(早期治疗组)、10d(中期治疗组)、20d(晚期治疗组)经尾静脉注射As2O3(5mg/kg·d);并以模型建立后10d经尾静脉注射生理盐水作为对照组。于接种癌细胞4周后,采集血、腹水和癌结节,分别检测其CEA含量。结果:早期治疗组的血、腹水和癌结节中的CEA含量均明显低于对照组
2、(P<0.01);晚期治疗组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:早期应用As2O3能有效降低荷瘤裸鼠的血清、腹水和癌结节中CEA水平。【关键词】结肠肿瘤腺癌三氧化二砷癌胚抗原肝脏肿瘤肿瘤转移【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatethechangeofCEAlevelsofblood,ascitesandcancertissueetastasesfromhumancolonadenocarcinomatreatedg/kg·d)in(earlytreatmentgroup),10d(middlet
3、reatmentgroup)and20d(latetreatmentgroup)afterthemodeloflivermetastasesfromhumancolonadenocarcinomainnudemiceodeloflivermetastasesentgroupentgroupandthecontrolgroup(P>0.05).Conclusions:TheCEAlevelsofblood,ascitesandcancertissueinnudemiceetastasesfromhumancolonadenocarcin
4、omacouldbeloodeloflivermetastasess·Adenocarcinoma·As2O3·Carcinoembryonic·Liverneoplasms·Neoplasmmetastasis结直肠癌(colorectalcancer,CRC)是当前最常见的消化道恶性肿瘤之一。肝脏转移是影响结直肠癌根治效果的主要因素之一。由于肝脏转移癌往往是多发的,有时甚至是弥漫性的,虽有手术切除、介入治疗、化学疗法等多种方法,但一直都未能取得较满意的效果。三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)系中药砒霜的主要成
5、分,近年来,许多临床研究均证实As2O3能有效治疗急性早幼粒细胞性白血病(acutepromyelocyticleukemia,APL),其完全缓解(pleteremission,CR)率可达87%[1]。本研究在建立人结肠腺癌裸鼠肝转移模型的基础上,于不同时相点应用As2O3治疗荷瘤裸鼠,观察荷瘤裸鼠的血液、腹水及癌组织中癌胚抗原(carcinoembryonic,CEA)的变化。为临床应用As2O3治疗CRC并肝转移提供实验基础。1 材料与方法1.1 细胞培养 表达CEA阳性的人结肠腺癌LS-174T细胞株由中国科学院上海细胞生物
6、研究所从美国标准菌库引进并提供,该细胞在接种裸鼠脾脏后可发生肝转移[2]。LS-174T细胞常规在RPMI1640培养液(内含10%灭活小牛血清、100U/mL青霉素、50mg/mL链霉素)中培养;置于CO2孵箱中,恒温37℃,5%CO2,饱和湿度。细胞培养密度(0.1~1.0)×106,倍增时间20~24h。每3~4天传代1次。取对数生长期细胞用0.25%胰酶(D-Hanks液配置)消化,制备成单细胞悬液,锥虫蓝染色测定细胞活力≥95%,调节细胞浓度为1×107mL-1备用。1.2 实验动物 BALB/C-nu/nu裸鼠32只(第三
7、军医大学实验动物中心提供),4~6周龄,雌雄兼用,体质量14~23g,在无致病菌(specificpathogenfree,SPF)条件下饲养。亚砷酸注射液(每支10mL,内含As2O310mg)由哈尔滨医科大学第一临床医院提供(批号:国药准字X19990191)。1.3 结肠腺癌裸鼠肝转移模型的建立 参照左国华等[3]方法进行。在超净工作台内按照无菌手术原则操作。1%戊巴比妥钠(35mg/kg)腹腔内麻醉,皮肤用75%乙醇消毒,左上腹纵行切口(长度约1.0cm),进腹后先小心结扎离断脾胃韧带,显露游离脾脏并拉至切口外。用4#针穿刺脾
8、组织(不要刺穿脾脏),缓慢(1~2min)注入LS-174T细胞悬液0.2mL(含细胞2×106个),可见注射部位脾脏被膜变白、肿胀,拔出针头后即用95%乙醇棉球压迫,以杀死可能溢出的癌细胞。轻揉5min后,切除脾脏,关
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