三氧化二砷对前列腺癌du145细胞裸鼠移植瘤作用的研究

《三氧化二砷对前列腺癌du145细胞裸鼠移植瘤作用的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterThestudyofarsenictrioxide’seffectontransplantedtumorofprostatecancercellsDUl45innudemiceBy：ChangLinSupervisor：Prof．LiuxingWangOncologyTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMarch2013学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交

2、的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：1卑啉日期：)。1弓年分月3c7日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全

3、部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：1书Ⅵ禾日期：如p年分月q日摘要三氧化二砷对前列腺癌DUl45细胞裸鼠移植瘤作用的研究硕士研究生：常琳导师：王留兴教授郑州大学第一附属医院肿瘤科中国河南郑州450052背景和目的前列腺癌在西方发达国家男性中较为高发，且死亡率较高；但近些年来，随着我国男性前列腺癌的发病率的直线上升，前列腺癌也正悄悄

4、改变着中国中老年男性的预期寿命和生活质量，并己成为肿瘤研究领域内一项越来越重要的课题，因此人们关于前列腺癌的发生发展机制、诊断技术、治疗途径及预后的监测均进行了大量的研究，其中前列腺癌的发病机制逐渐引起了人们的重视，以求做到早诊断，早治疗，提高其治愈率。DNA异常甲基化作为表观遗传学中最常见的现象之一，其在恶性肿瘤发病机制中占据着举足轻重的地位，DNA高甲基化可抑制基因表达，导致基因沉默，此发生率比基因突变更高；而低甲基化可导致基因印记丢失，同样可致癌变。对于前列腺癌，DNA甲基化也成为其研究的新热点，它揭示了前列腺癌的发生发

5、展的分子机制，提高了前列腺癌的早期诊断率，评估预后并为其治疗提供新靶点。目前发现前列腺癌中至少有50种基因存在高甲基化现象，包括谷胱甘肽S．转移酶(GSTPl)基因、钙粘素(CDH)基因、维甲酸受体D(RARl3)基因、死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因、Ras相关区域家族1A(RASSFlA)基因、雄激素受体(AR)基因等；其中RASSFlA基因作为一种新型候选抑癌基因，具有调控细胞周期、调节细胞凋亡及微管稳定性等生理功能，在多种肿瘤中均表现为高甲基化状态；而GSTPl可代谢多种外来毒物及致癌化合物，从而避免损伤DNA，保护正

6、常细胞，防止肿瘤细胞形成。同时，DNA甲基化是一可逆过摘要程，可给予甲基化抑制剂进行逆转。本研究选取三氧化二砷(As203)作为DNA甲基化抑制剂，探讨它对RASSFlA及GSTPl基因甲基化状态的逆转及可能的机制，为前列腺癌的诊断和治疗提供实验依据。材料和方法1．细胞培养选用雄激素非依赖性前列腺癌DUl45细胞，用PRMI．1640培养液(含10％胎牛血清)在细胞培养箱中(T：37。C，5％C02)常规培养；2．建立前列腺癌裸鼠移植瘤模型并处理、分组取DUl45细胞(处于对数生长期)，制成单细胞悬液，以l×107／ml的浓度

7、接种裸鼠，注射部位为右侧前肢近腋窝处背部皮下。将筛选过后的裸鼠随机分为4组，分别给予生理盐水、比卡鲁胺、三氧化二砷、三氧化二砷+比卡鲁胺，成瘤后处死取标本；3．应用RT-PCR检测四组组织标本中RASSFlA、GSTPlmRNA的表达，观察其差异性；4．应用甲基化特异性PCR检测四组标本中RASSFlA、GSTPlDNA的表达，观察其DNA甲基化情况；5．应用免疫组织化学法检测四组标本中RASSFlA、GSTPl蛋白的表达情况；6．统计学处理：采用SPSS17．0软件进行分析，定量资料采用t检验，以a=0．05为检验水准。9±

8、甲：口木1．RT．PCR结果显示：As203组和As203+比卡鲁胺组处理后的前列腺癌移植瘤组织RASSFlA及GSTPlmRNA均恢复表达。且无明显差异(P>O．05)；2．MSP结果显示：As203组和As203+比卡鲁胺组处理后的前列腺癌移植瘤组织RASSFlA及GST