微生物的实验室培养导学案(含答案)

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1、基础知识课题1微生物的实验室培养一、培养基1.概念：人们按照微生物对营养物质_的不同需求，配制!11的供其生长繁德的营养甚2.种类：按照培养基的物理性质划分(1)_液体_培养基：配制成的__培养基：迕_(2)_液体_状态的基质。液体_培养基中加入細剂-如琼脂后，配制成的._状态的基质，是实验室屮最常用的培养基之一，微生物在其上面生长，可形成肉眼可见的菌落_O3.组成成分：各种培养基的具体配方不同，但一般都有水、氳遲、_无机盐，此外培养基还需要满足微生物生长对._特殊营养物质以及_氨气__的需求。二、无菌技术获得纯净培养物的关键

2、是_1.消毐是指使用_较为温和对人体有害防止外来杂菌的入4毒法PH__的物理方法或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分_的微生物(不包括，芽孢_和孢子_实验室常用的消毒方法有_煮沸消巴氏消毒法化学药剂消毒法2.灭菌是指使用_和孢子3.实验操作中避免杂萌的污染，主要包括四方面的内容:(1)对实验操作的，空间_、操作荇的，衣着和手..的理化因素杀死..的微生物，包括.芽;常用的火菌方法有灼烧灭菌.干热灭菌高压蒸汽灭菌(2)将用于微生物培养的_器皿_进行清洁和消毒。种用具_和_培养基_等进行火菌_附近进行,(3)为避免周围环境中微生物

3、的污染，实验換作应在_濟精灯火焰(4)实验操作时应避免己经灭菌处理__的材料用具与周围物品相接触4.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被_使用后的培养基丢弃前一定要进行_灭菌_处理，以免污染环境。三、分离纯化大肠杆菌本实验使用的培养某为_牛肉膏蛋白胨_培养甚。进行大肠杆菌的纯化培养，对分为._制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段。、溶化1.制备培养基的一般步骤为:•倒平板0-灭菌-和稀释涂布法2.纯化大肠杆菌：微生物接种最常用的方法是_平板划线法_(1)平板划线法通过接种环_在琼脂固体培养基表面连续划线

4、.的操作，将.的菌种逐步稀释分散到培养基的表而(2)稀释涂布平板法则是将萌液进行一系列的_._分布涂布_到琼脂固体培养基的表面，进行培养梯度稀释然后将不同稀释度的荫液3.菌落的概念:4.结果分析：.由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体_（1）如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基木一致，符合要求：说明.（2）若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中_有杂菌未消化:（3）未接种大肠杆菌的空白对照的培养基迕培养过程中若长出菌落，则说明_培养基灭菌不彻底，实验失败。四、菌种保存1.对于频繁使用的菌种，可以采用

5、..临时保藏.的方法（1）过程：首先将菌种接种到试管的_周体斜面培养基上_，合适温度下培养，菌落忪成后，放于_4°CL冰箱屮保藏，每隔3—6个月，都要将菌种从旧的培养基上转移到新的培养基上。.的方法，将培养的菌液与等体积灭（2）缺点：保存时间短_，菌种容易被污染或产生变异_。2.对丁•需要忪期保存的菌种，对以采用菌后的甘油混匀于_-20aC_的冷藏箱内保存随堂练习1.用T•板划线法或稀释涂介T•板法纯化大肠杆菌时（c）①可以用相冋的培养甚②都需要使用接种针进行接种③都需耍在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A.①②B.③④C.

6、①③D.②④2.下列有关微生物培养与应用的说法正确的是（C）A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双于等进行严格的灭菌处理C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分离分解尿素的细菌时，尿素是培养甚中唯一的氮源和碳源3•下列对火菌和消毒的理解不正确的是（B）A.灭菌是指杀灭环境巾的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B.消毒和灭菌实质上是完企相的C.接种环用灼烧法灭荫D.常用灭茼方法有灼烧灭菌法、丁热灭菌法、髙压蒸汽灭萌法4.用来判断选择培养甚是否起

7、到了选择作用需要设置的对照是（C）A.未接种的选择培养基B.未接种的牛肉膏蛋內胨培养基C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D.接种了的选择培养基5.下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是（A）A.微生物培养前，需对培养某进行消毐B.分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C.测定土壤样品巾的细菌数目，常用菌落计数法D.分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养甚中唯一的氮源6.三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基，然后接种相同的人肠杆茼样液。培养36h后，计算菌落数，结果如下表。下列选项正确的是(D)培养皿培养基成分菌落数

8、I琼脂、葡萄糖35II琼脂、葡萄糖、生长因子250III琼脂、生长因子0A.该实验采用的是液体培养基B.该实验采用平板划线法接种c.I和m对照，说明大肠杆菌的生忪不需要生忪因子d.n和m对照，说明大肠杆菌的牛长需要葡萄糖7.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是(C)A.计算、称