丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝（癌）细胞凋亡的关系

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1、丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝（癌）细胞凋亡的关系【关键词】,C型肝炎病毒属　　关键词:C型肝炎病毒属;癌，肝细胞;蛋白表达　　摘要:目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝（癌）细胞凋亡的关系及其意义.方法采用免疫组织化学方法检测HCV核心区抗原和NS3区抗原在肝硬变（LC）和肝细胞肝癌（HCC）组织中的分布，同时对连续切片进行原位凋亡检测并计算凋亡指数.结果HCV核心区抗原定位于肝细胞或肝癌细胞的胞质或胞核中，在LC组织中，核心抗原呈弥漫或灶状分布于肝细胞胞质，偶见胞核阳性的肝细胞，阳性率为60.7%;核心抗原在癌组织中以核阳性分布为主，阳

2、性率为37.6%，癌旁肝组织以胞质阳性为多见.HCC中HCV核心抗原的核阳性率（75.0%，15例/20例）明显高于其在LC（17.7%，6例/34例）及癌旁肝组织（11.8%，2例/17例）中的阳性率（P<0.05）;在HCC中，HCV核心抗原核转位表达的癌组织的AI值（0.174±0.093）显著低于胞质阳性的癌组织（0.512±0.113，P<0.01）.HCVNS3区抗原定位于肝细胞或肝癌细胞的胞质中，在LC和HCC组织中的阳性率分别为53.6%和39.6%.未发现HCVNS3区抗原的表达与肝（癌）细胞凋亡的相关性.结论HCV感染

3、与我国LC，HCC的发生关系密切，HCV核心抗原在肝癌组织中常发生核转位表达，这种核转位表达抑制了肿瘤细胞发生凋亡，从而促进肿瘤组织的进一步恶化.　　Keya，hepatocellular;proteinexpression　　Abstract:AIMToanalyseexpressionofHCVcoreproteinandapoptosisinformalin-fixedparaffin-embeddedtissuesoflivercirrhosisandhepatocellularcarcinoma.METHODSImmunohistochem

4、istrymethodmunohistochemistryshoainlylocalizedinthecytoplasmofhepatocytes.ISELshoightinitiatedapoptosis.Incanceroustissues，translocatedexpressionofHCVcoreproteinorcells.AccordingtoISELonserialsec-tions，allthesepositivetumorcellshardlyexhibitedapoptosis（AIfornuclearpositive，0.17

5、4vsAIforcytoplasmicposi-tive，0.152，P<0.01）.HCVNS3antigenainlydis-tributedinthecytoplasmofhepatocytes.ayexpressinthenucleioftumorcell.Translo-catedexpressionofHCVcoreproteinmayinhibitapoptosisinthetissueofhepatocellularcarcinoma.　　0引言　　自1989年Choo等克隆出丙型肝炎病毒（HCV）以来，各国学者从分子病理和免疫

6、病理的角度寻找HCV与宿主相互作用的关系，进行HCV特异性抗原的表达与HCV相关性肝疾病之间关系的研究，证实HCV感染是肝硬变（LC）、肝细胞肝癌（HCC）发生的一个重要危险因素［1］.肝（癌）细胞的凋亡与HCC的发生和发展有着密切的联系.研究表明HCV的感染与肝（癌）细胞的凋亡有关［2］.HCV核心区和NS3区基因编码的蛋白具有较高的保守性.我们采用ABC法，对HCV核心区和NS3区抗原在LC，HCC组织中进行定位研究，进一步探讨HCV与HCC发生的关系.　　1材料和方法　　1.1材料均为我院1994/1996年外科手术切除标本，其中LC56例，H

7、CC53例，45例带有癌旁肝组织.所有标本经100mL・L-1福尔马林固定、脱水，常规石蜡包埋，制备5μm厚连续切片，APES胶（Sigma，USA）对玻片进行处理以防脱片.HCV核心区抗原2B株单克隆抗体由军事医学科学院基础所惠赠.HCVNS3区抗原单克隆抗体由北京医科大学人民医院肝病研究所惠赠.　　1.2方法采用VectorLab公司生产的ABC试剂盒对石蜡切片经常规脱蜡至水后，进行免疫组织化学染色，根据操作手册进行，并做对照实验.连续切片进行HE染色.原位凋亡检测技术采用武汉博士德公司生产的原位末端标记试剂盒，根据操作手册和已有文

8、献［3］进行，显微镜观察，对福尔马林固定石蜡包埋的组织片采用蛋白酶K（20mg・L-1，15m