丙型肝炎病毒不同基因型核心蛋白对肝母细胞瘤细胞凋亡影响的比较-论文.pdf

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1、中国肝脏病杂志(电子版)》2014年第6眷第1期·论著·1丙型肝炎病毒不同基因型核心蛋白对肝母细胞瘤细胞凋亡影响的比较冯胜虎，鞠威，全敏，杨松，刘顺爱，张锦前’。，王琦，梁金秋，一，纪世博，-，成军1,2(1．首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所，北京100015；2．新发突发传染病研究北京市重点实验室，北京100015；3．首都医科大学附属北京地坛医院内五科，北京100015)摘要：目的比较HCV不同基因型核心蛋白(core)在肝母细胞瘤细胞凋亡中的作用。方法构建6a基因型HCVcore的表达载体pcDNA3．1／myc．His

2、(一)．core(6a)[pCore(6a)]；分别将1b、3a和6a基因型HCVcore质粒以及空质粒pcDNA3．1／myc．His(一)(pNC)瞬时转染HepG2细胞，48d'时后利用流式细胞术检测细胞凋亡发生的情况；利用Rea1．timePCR检测胱冬肽酶．3的mRNA水平变化；利用化学发光法检测胱冬肽酶．3的活性变化，比较HCV不同基因型core对细胞凋亡作用的差异。结果成功构建了6a基因型HCVcore的表达载体pcDNA3．1／myc．His(一)．core(6a)[pCore(6a)】；与pNC组相比，表达1b、3a

3、和6a基因型HCVcore的HepG2细胞中，AnnexinV细胞数均显著减少，其中6a基因型core较1b和3a基因型core作用显著(P=0．000、0．001)；同时实验组中凋亡效应分子胱冬肽酶．3的mRNA水平及其活性较对照组均降低；其中与1b和3a基因型core相比较，6a基因型core显著降低胱冬肽酶．3的mRNA水平，而在抑制胱冬肽酶．3活性方面无显著差别。结论HCV不同基因型core对细胞凋亡的作用不同；基因6a型core对细胞凋亡的抑制作用更为显著：HCV基因6型核心蛋白可能更易导致肝癌的发生，有待进一步研究。关键词

4、：肝炎，丙型；基因型；核心蛋白；细胞凋亡EfectsofHCVcoreofdifferentgenotypesoncellapoptosisofHepG2cellFENGSheng．hu，JUWei1'，QUANMin，YANGSong，LIUShun—ai，ZHANGJin—qian，WANGQi，LIANGJin—qiu，JIShi-bo，CHENGJun．InstituteofInfectiousDiseases,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing10001

5、5，China,"2．BeijingKeyLaboratoryofEmergingInfectiousDiseases．Beijing100015．China,"3．TheFhDepartmentoflnternalMedicine,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China)Abstract：0bjectiveTocomparetheefectsofHCVcoreofdiferentgenotypesoncellapoptosisofHepG2c

6、el1．MethodsTheplasmidpcDNA3．1／myc—His(一)-coreofgenotype6a[pCore(6a)]wasconstructed．AndthenpCore(1b)，pCore(3a)，pCore(6a)andnegativecontrolpcDNA3．1／myc—His(一)(pNC)weretransientlytransfectedintoHepG2cellsrespectively．Flowc~ometrywasusedtoobservecellapoptosispost48hourswhil

7、ethemRNAlevelsandactivitiesofcaspase-3weredetectedbyReal—-timePCRandcaspase·-glo3／7luminometerrespectively．Then，comparethedifferenteffectsofHCVcoreofdiferentgenotypesoncellapoptosiswerecompared．ResultsTheplasmidpcDNA3．1／myc-His(一)-coreofgenotype6a[pCore(6a)]wassuccessfu

8、llyconstructed．Comparedwithcontrolgroup，thenumberofAnnexinV-positivecellswerealldecreasedincore(1b)，core(3a)or