丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床诊断价值

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1、丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床诊断价值作者：许红,张淑兰单位：河北省石家庄市第四医院检验科；河北省石家庄市中医院检验科【关键词】病毒丙型肝炎是严重威胁人类健康的传染病之一，山于至今尚无预防疫苗问世，也没有特效药物治疗，因此早期诊断是防止丙型川•炎病毒(hepatitisCviral,HCV)传播的有效手段。临床上主要靠实验室诊断来辅助诊断HCV感染，了解患者体内HCV复制的情况，常用的有丙型川啖病毒抗体(HCVAb)和HCVRNAo但是，HCVAb产生有一-个明显的窗口期，早期感染容易漏检，对感染恢复后样品产牛误判，而且rh于

2、不同厂商的试剂包被的HCV抗原片段有所不同，导致检测结果缺乏对比性，故难以对感染后的进程及转归提供依据。PCR检测HCVRNA灵敏度高，但影响因索也多，实验室条件要求严格，且检测费川昂贵。据文献报道[1-4],HCV核心抗原阳性样品HCVRNA阳性率为85%以上，两者同步消长，具有极高的相关性。HCV抗原检测能够缩短HCV检测窗口期，近儿年对这方面的报道陆续增多，具有可行性和较广泛的应丿IJ基础。木研究采川ELISA方法检测丙型肝炎病毒抗原(HCVAg),对其临床应用价值进行评价。1资料与方法1」标本來源选取2006年11〜1

3、2月我院住院及门诊患者血清样木91份，其中男44份，女47份；年龄13〜79岁，平均年龄47.7岁。所有病例选择均符合2000年中华医学会传染病与寄生山病学分会指定的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准[5],并排除合并感染其他病毒性肝炎，排除心、脑、肾、肺等器官疾病及高血压、糖尿病等。1.2标本检测1.2.1ELISA检测的简要步骤:取样本血清100μl,加预处理液50μl,56°C水浴30min。酶标板每孔加入100μl样品稀释液(包括空阴、阳对照孔，空H孔需加入200μl样品稀释液)；力叭100&m

4、u;l阴、阳对照孔于相应孔，其余孔各加入100μl经预处理后的待测样品；37°C水浴振荡60mino洗板6次。每孔加200μl酶结合物，37°C水浴30min,再洗板。故后显色剂A、B液各100μl,37°C水浴避光显色10min后加50μl终止液。反应终止10min内，以酶标仪450nm波长测定各孔OD值。临界值(cutoff)确定：阳性对照每孔OD值>0.6,阴性对照孔OD值V0.1时，测定结果令效，其临界值(cutoff)为：阴性对照孔平均OD值+0.06。结果判定：待检测样品的OD值〉临界值判定

5、为HCV抗原阳性，<临界值判定为HCV抗原阴性。1.2.2每份血清同时用ELISA法检测抗HCV,检测试剂山上海科华试剂公司提供。1.2.3每份血清川ABIPRISM7000PCR仪荧光定量逆转录聚合酶反应(PCR)检测HCVRNA含量，检测试剂由广州达安基因股份有限公司提供。1.2.4每份血清用日本OlympusAu2700全口动牛化分析仪测定ALT浓度，检测试剂由笫一化学药品株式会社提供。1.3统计学分析釆用SAS8.2统计软件进行统计学处理，计数资料比较采用进行&chi：2检验，PV0.05为差异有统计学意义。2结果2」

6、62份HCV抗体阳性标木屮抗原的检出率为22.6%；29份HCV抗体阴性标木中抗原的检出率为6.9%,见表1。两种样品检出率差异有统计学意义(χ2=6.128,P<0.05)<>2.216份抗原阳性标本中HCVRNA阳性14份，75份抗原阴性标本中有2份RNA阳性者，二者符合率是70.3%。见表2。2.229份抗体阴性标木屮检出抗原阳性2份，HCVRNA证实均为阳性。表1HCV抗体阳性和阴性标木中抗原的检出率情况(略)注：与HCVAb(-)比较，P<0.05表2HCVAg与HCVRNA的符合率情况(略)3讨论HC

7、V的主要特征为具有较高的发展为慢性肝炎的趋势，而口相当一•部分患者可能发展为肝换化甚至川:癌。目前具有典型临床表现的急性丙肝患者已经很少见，故实验室的早期诊断对控制HCV感染的传播具有非常重要的意义，人们一直在致力于寻找和研究灵皱度高、特异性强、操作简单、经济实用、易于推广的检测方法和检测项目。人感染HCV后，存在一个相当长时间的病毒血症阳性，血清抗体阴性，这一段时间称为检验“窗口期”,HCV在体内复制活跃，传染性很强。采用ELISA方法检测HCV抗体(IgG)是临床最常川的手段之一，从第1代试剂到第3

8、代试剂的进步，大大提高了HCV抗体检测试剂的灵敏度。但是，山于HCV具有高度的变异性,加上我国应用ELISA进行HCV检测的试剂盒及试剂抗原来源各异，致使HCV阳性率有较人的差别。而H-,IgG抗体阳性者无法判断是否首次或再次新近感染，H.效价高低并不能反映HCV感染的进程。