体外循环血浆对体外培养人脐静脉血管内皮细胞钙池操纵的钙通道电流的影响.doc

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1、以腹痛为首发症状的儿童过敏性紫癜临床及胃镜分析【摘要】@电流的影响编辑。作者：汪进益，范慧敏，张旭敏，卢蓉，李健刘中民【摘要】目的探讨经体外循环（cardiopulmonarybypass,CPB）后人体炎性血浆对体外培养的人胳静脉血管内皮细胞（HumanUmbilicalVEinEndothelialCells,HUVECs）的钧池操纵的钙通道电流（store-operatedCa2+currents,Isoc）的影响。方法CPB后血浆采自我科心血管外科手术患者，患者均知情同意。将已培养好的HUVECs按所加入的血浆不同分为4组，每

2、组6例：即组I（加入CPB刚开始Omin时血浆的对照组）、组II（加入CPB后25min的血浆）、组111（加入CPB后50min的血浆）及组IV（加入CPB后50min含左旋精氨酸的血浆）。应用全细胞膜片钳记录技术测定并观察各组HUVECs的Isoc变化。结果在HUVECs上可记录到Isoc;当钳制电位为-lOOmV时，组I〜组IV中HUVECs的Isoc分别为（-士）pA、（-土）pA、（-土）pA及（-土）pA，各组比较差异有统计学意义（P【关键词】体外循环；血管内皮细胞;钙池操纵的钙通道电流;膜片钳技术Abstract：OBJ

3、ECTIVEToobservetheeffectofinflammatoryplasmaonstore-operatedCa2+currents(Isoc)ofhumanumbilicalvEInendothelialcells(HUVECs)culturedinvitroaftercardiopulmonarybypass(CPB)incardiovascularsurgery.METHODSTheplasmawascollectedfrompatientsofDepartmentofCardiacSurgery,ShanghaiE

4、astHospitalAffiliatedTongjiUniversity.Thepatientsallknewtheprogramandagreedwith.TherandomlyselectedHUVECsweredividedintofourgroupswithsameculturecondition：GroupI(controlgroupaddingtheplasmaafterOminCPB),GroupII(addingtheplasmaafter25minCPB),GroupIII(addingtheplasmaafter

5、50minCPB)andGroupIV(addingtheplasmawithL-arginineafter50minCPB).ThelsocofHUVECsineachgroupwasdeterminedbywholecellpatch-clamptechniques.RESULTSThedynamicchangesofthelsocofthesingleHUVECswasdeterminedbytight-sealwhole-cellpatch-clamptechniques.Atthepotentialof-lOOmV,thep

6、eakamplitudeofIsocofHUVECswere(-+)pA,(-土)pA,-(+)pAand(-土)pA,respectivelyinthesegroups.Thelsocwassignificantlylowerinthecontrolgroupthaninothergroups(PKeywords：Cardiopulmonarybypass；Vascularendothelialcells；Store-operatedCa2+currents；Patch-clamptechniques血管保护是体外循环(cardio

7、pulmonarybypass,CPB)过程中的一个重要组成部分，近年来的研究表明，血管内皮细胞不只是血液与间质组织间的屏障，还具有接受和传递信息以及内分泌功能［1］。Ca2+作为细胞内第二信使，在维持细胞代谢、增值、分裂和凋亡、Ca2+依赖蛋白激酶和磷脂酶的激活、胞外分泌及基因调控等多种过程中具有重要的作用。血管内皮细胞等非可兴奋细胞内Ca2+浓度维系的主要途径是鈣池操纵的Ca2+通道(store-operatedcalciumchannelsSOC)，即Ca2+内流是通过细胞内兴奋剂敏感性钙池中Ca2+浓度调节的［2-5］。本实验

8、采用人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)培养的方法，应用膜片钳技术研究CPB后炎性血浆对HUVECs胞膜上SOC电流(store-operatedCa