体外循环血浆对体外培养人脐静脉血管内皮细胞钙池操纵的钙通道电流的影响

《体外循环血浆对体外培养人脐静脉血管内皮细胞钙池操纵的钙通道电流的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、体外循环血浆对体外培养人脐静脉血管内皮细胞钙池操纵的钙通道电流的影响：汪进益，范慧敏，张旭敏，卢蓉，李健，刘中民【摘要】目的探讨经体外循环(cardiopulmonarybypass,CPB)后人体炎性血浆对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells,HUVECs)的钙池操纵的钙通道电流(store-operatedCa2+currents,Isoc)的影响。方法CPB后血浆采自我科心血管外科手术患者，患者均知情同意。将已培养好的HUVECs按所加入的血浆不同分为4组，每组6例：即组Ⅰ(加

2、入CPB刚开始0min时血浆的对照组)、组Ⅱ(加入CPB后25min的血浆)、组Ⅲ(加入CPB后50min的血浆)及组Ⅳ(加入CPB后50min含左旋精氨酸的血浆)。应用全细胞膜片钳记录技术测定并观察各组HUVECs的Isoc变化。结果在HUVECs上可记录到Isoc；当钳制电位为-100mV时，组Ⅰ～组Ⅳ中HUVECs的Isoc分别为(-302.38±35.13)pA、(-388.59±58.66)pA、(-577.04±93.69)pA及(-365.42±34.79)pA，各组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，其

3、中组Ⅳ明显低于组Ⅲ(P<0.01)。结论CPB后人体炎性血浆可增强血管内皮细胞的钙通道电流，左旋精氨酸可减轻此作用，这对于进一步深入研究CPB围术期血管内皮细胞钙超载的发生机制和防治具有重要意义。【关键词】体外循环;血管内皮细胞;钙池操纵的钙通道电流;膜片钳技术Abstract:OBJECTIVEToobservetheeffectofinflammatoryplasmaonstore-operatedCa2+currents(Isoc)ofhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)cultured

4、invitroaftercardiopulmonarybypass(CPB)incardiovascularsurgery.METHODSTheplasmapatientsofDepartmentofCardiacSurgery,ShanghaiEastHospitalAffiliatedTongjiUniversity.ThepatientsallkneandagreedlyselectedHUVECseculturecondition:GroupⅠ(controlgroupaddingtheplasmaafter0minCPB),GroupⅡ

5、(addingtheplasmaafter25minCPB),GroupⅢ(addingtheplasmaafter50minCPB)andGroupⅣ(addingtheplasmainCPB).TheIsocofHUVECsineachgroupinedbyptechniques.RESULTSThedynamicchangesoftheIsocofthesingleHUVECsinedbytight-sealptechniques.Atthepotentialof-100mV,thepeakamplitudeofIsocofHUVECsar

6、kedlypotentiatethepeakamplitudeofIsocinadose-dependentmanner,butL-argininecanattenuatethisprocess.Keyonarybypass;Vascularendothelialcells;Store-operatedCa2+currents;Patch-clamptechniques血管保护是体外循环(cardiopulmonarybypass,CPB)过程中的一个重要组成部分，近年来的研究表明，血管内皮细胞不只是血液与间质组织间的屏障，还具有接受和传递信息以

7、及内分泌功能［1］。Ca2+作为细胞内第二信使，在维持细胞代谢、增值、分裂和凋亡、Ca2+依赖蛋白激酶和磷脂酶的激活、胞外分泌及基因调控等多种过程中具有重要的作用。血管内皮细胞等非可兴奋细胞内Ca2+浓度维系的主要途径是钙池操纵的Ca2+通道(store-operatedcalciumchannels，SOC)，即Ca2+内流是通过细胞内兴奋剂敏感性钙池中Ca2+浓度调节的［2-5］。本实验采用人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)培养的方法，应用膜片钳技术研究CPB后炎性血浆对

8、HUVECs胞膜上SOC电流(store-operatedCa2+currents,Isoc)的影响，以进一步丰富CPB中有关血管保护研