热水法提取香菇多糖和茶树菇多糖研究

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1、热水法提取香菇多糖和茶树菇多糖研宄摘要:真菌多糖具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒和免疫调节等多种生理功能,且对机体毒副作用小,具有广阔的开发前景。以营养价值和药用价值均较高的香燕(Lentinusedodes)、茶树燕(Agrocybeaegirit)为原料,用热水提取法在90°C、料液比1:20(g:mL)、提取1次、4h的条件下,提取两种真多糖。结果表明,热水法提取香菇多糖的得率为9.70%,茶树菇多糖的得率为13.10%,说明茶树菇中的多糖含量高于香菇。该研宄可为后续开发利用真多糖提供重要依据。关键词:香菇(Lentinusedodes);茶树菇(Agrocybeaegirit);多糖

2、;热水提取法中图分类号:S646.1+2;S646.9文献标识码:A文章编号:0439-8114(2016)16-4258-03DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.16.047真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体和发酵液中分离出的一种活性物质。真菌多糖具有降血糖、免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗突变、抗衰老和抗炎等多种生理功能[1]。在一些食用菌中含有多种真菌多糖,如香菇(Lentinusedodes)、茶树菇(Agrocybeaegirit)、猴头菇(Hericiumerinaceus)等。香菇多糖一级结构的主链为(1,3)-D-葡聚糖,在主链的C6位

3、上含有支点(每5个葡萄糖有2个支点),其支链由爲-(1,6)键和(1,3)键相连的葡聚糖组成,在支链上也含有少数内部(1,6)键[2]。目前,在医药和保健品行业,香菇多糖产品具有极大的市场前景。茶树菇多糖的含量很高,可达干重的30%〜40%,主要成分为a-(1,3)-D-葡聚糖,还含有甘露糖、半乳糖、鼠李糖、木糖及阿拉伯糖等[3]。其药理作用十分广泛,是一种极具开发前景的真菌多糖。20世纪60年代以后,随着真菌多糖生物活性不断被发掘,越来越多的真菌多糖产品被开发,应用于保健品和医药行业。目前,国内外已从近300种真菌中分离出200多种有生物活性的多糖物质[4]。专家预言,21世纪将是多糖的时代

4、。显然,如何提高真菌多糖的得率和品质已成为首要解决的问题。现在常用的提取真菌多糖的方法有:热水提取法、酸提法、碱提法、酶法等。酸、碱提法虽耗时短,提高了多糖得率,但易破坏多糖结构;酶法反应条件温和,但较难控制试验条件,对操作要求高。而热水提取法因操作简单、有机溶剂使用量少、对多糖的生物活性破坏小和试验成本低,成为目前提取真菌多糖最常用的方法。热水法提取真菌多糖时,原料的粉碎程度、提取温度、时间、次数、料液比以及醇析时乙醇添加倍数都可能影响多糖得率。苏红等[5]研究发现当原料粉碎度达到70目以上时,粉碎度对多糖提取率的影响较小,且粉碎度过高反而会降低多糖得率。真菌多糖的提取率常随温度的升高而增大

5、,但温度太高则会破坏多糖的结构,所以提取温度常据经验和试验条件控制在90°C左右[5]。一般而言,真菌多糖的最佳提取时间在3h以上,且时间越长,多糖得率越高,但超过一定时间,多糖得率升高不明显。李浩飞等[6]在研究桦褐孔菌多糖的水提工艺时,得出结论:当料液比为1:5、1:10、1:20(g:mL,下同)时,提取次数这一因素影响不大,且提取1次即可。目前,国内许多学者对热水提取法的工艺进行了研宄和优化,得到的结果一般是提取温度90〜100°C,提取2〜4h。因此,在充分研宄热水提取法对多糖得率的影响因素和条件设置基础上,该研宄通过热水提取法对香菇多糖和茶树菇多糖进行了提取,并比较两者的多糖得率,

6、进而比较香菇和茶树菇中多糖含量,以期指导工业生产选取合适的原材料,来获得较高的多糖产量。1材料与方法1.1材料与试剂干香菇、干茶树菇、葡萄糖、蒸馏水、乙醇(密度0.79g/mL)、氯仿、正戊醇、浓硫酸、苯酚(除硫酸为优级纯外,其他试剂均为分析纯)。1.2仪器与设备202型电热恒温干燥箱、LFP-2500A型高速多功能粉碎机、722S型可见光光度计(上海菁华科技仪器有限公司);TD5-II型低速多管架自动平衡离心机(长沙平凡仪器仪表有限公司);SHZ-D(III)型循环水真空泵(上海青浦沪西仪器厂);HH-42型数显恒温三用水箱。250mL锥形瓶、玻璃棒、500mL抽滤瓶、电子天平、药匙、称量纸

7、、滤纸、布氏漏斗、剪刀、容量瓶、量筒、试管、试管架、胶头滴管、移液枪、枪头、比色皿、15mLEP管、20目筛子。1.3方法1.3.1标准曲线的制备105°(?干燥葡萄糖至恒重,称取100.0mg,加蒸馈水溶解后定容于100mL容量瓶中,摇匀,配成浓度为lmg/mL标准葡萄糖溶液。吸取己配制的葡萄糖标准品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL置于6个50mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度线

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