香菇多糖的复合酶法提取

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1、香菇多糖的复合酶法提取香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质。香菇多糖的作用：香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤，调节免疫力、降血糖、抗氧化等功能。有关香菇多糖的研究，特别是结构方面的研究已引起国内外学者的高度关注，并有望成为多糖领域的研究热点。与其他抗肿瘤药物相比，香菇多糖几乎无任何副作用，对胃癌、鼻咽癌、直肠癌、乳腺癌和慢性粒细胞白血病等有抑制和防止术后微转移的作用，是目前已知最强的免疫增强剂之一。香菇多糖的提取方法：热水浸提法超声波提取法稀酸(碱)浸提法微波法提取香菇多糖深层发酵培养提取法酶解法

2、酶解法：酶解法就是指在浸提的过程中加入相应的酶来水解纤维素、果胶、蛋白质分子等，以使多糖从细胞中分离出来。酶法提取较其他方法的优点1.其作用条件温和。2.通过酶法破壁去除杂质可以明显提高提取率，缩短提取时间。3.可减少能源消耗。4.有效的保存多糖的生物活性。复合酶提取香菇多糖：复合酶纤维素酶+木瓜蛋白酶纤维素酶+中性蛋白酶木瓜蛋白酶+纤维素酶中性蛋白酶+纤维素酶多糖得率（%）12.907.029.466.34香菇多糖的制备工艺一.原料准备二.提取三.分离纯化香菇的复合酶法提取原料的准备和处理香菇→烘干(50

3、℃)→粉碎→过筛→多糖提取原材料。香菇的复合酶法提取主要实验试剂及仪器真空干燥箱，离心机，恒温振荡器，紫外可见分光光度计，傅里叶变换红外光谱仪，纤维素酶，木瓜蛋白酶实验方法与步骤反应结束，将三角瓶放到沸水锅中，10min沸水浴灭酶。称取木瓜蛋白酶和纤维素酶按一定比例混合，加入5mL蒸馏水溶解。香菇溶液放在水浴中预热至酶解温度，将酶液加入到香菇溶液中，在恒温振荡器上提取。称取80目的香菇粉2g，放入到250mL的三角瓶中，加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中，水浴30min，调节pH值。345灭酶结束

4、，冷却至室温，将酶提取液放入到离心管中，调至4000r/min离心，取上清液，即得到酶提取多糖清液。21香菇的复合酶法提取香菇的复合酶法提取分离纯化1.分离提取用0.5%NaOH初步提取，之后取清液，用透析袋透去除杂离子，透析后去除杂蛋白，用活性炭脱色1h，加入95%乙醇，使溶液中乙醇的浓度达到75%进行醇沉．醇沉过程中要将其保存在4℃冰箱中，保持24h，离心15min，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可得到香菇粗多糖。2.纯化将香菇粗多糖水溶解后用色谱仪分离，干燥获得纯香菇多糖。影响香菇多糖得率的因素：随

5、着复合酶浓度的增加，多糖提取率也逐渐增加，酶浓度大于0.4%后提取增加率趋于平缓，因此，最佳复合酶的浓度为0.4%。1.复合酶的浓度对多糖得率的影响2.料液比对多糖得率的影响当料液比在1∶15～l∶25之间多糖提取率增长较快，继续提高料液比多糖提取率仍有升高，但提高速率减小．因此最佳料液比为1∶20．3.酶解时间对多糖得率的影响由图可知,香菇多糖的提取率随酶促反应时间的延长增加。酶法提取的应用前景：酶法提取由于反应特异性强、条件温和易获得、提取时间短、提取率高、绿色节能等已引起广泛的关注，具有较大的应用潜力

6、，且随着对酶法技术的不断研究，酶法与其他技术如超声波、超高压、微波等技术的联用也将成为另一个热点研究方向。Thanks