探析复合酶法提取大枣多糖的研究

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1、Y8a33{7分类号——密级——单位代码：学号；1069720032749西北大学硕士学位论文指导教师——墓墨专业技术职务堑撞学科(专业)垡茎三猩答辩日期扣‘．#·f学位授予日期复合酶法提取大枣多糖的研究摘要本文以陕北大枣为原料，比较了大枣多糖的不同提取方法，分别研究用酸性蛋白复合酶和中性蛋白复合酶来提取大枣多糖，探索出两条较为成熟的不同复合酶参与的大枣多糖提取工艺路线。并对试验所得大枣多糖进行了红外光谱和紫外光谱分析。在后续的研究工作中，对大枣渣中食品功能基料膳食纤维进行初步研究。首先，通过对大枣多糖不同提取方法的对比，优选出

2、酸性蛋白复合酶提法来提取大枣多糖，并对复合酶中的酸性蛋白酶以及果胶酶进行酶活测定，明晰其应用状态。其次，研究酸性蛋白复合酶参与大枣多糖提取工艺，进行以多糖得率、多糖纯度为指标的单因素试验，在此基础上研究以酶浓度、温度、加酶pH值为因素的三因素三水平正交试验，结合试验结果分析了因素及水平对多糖得率、多糖纯度的影响和原因，由此法获得的产品多糖得率可达4．9096，纯度47．9096。再次，研究中性蛋白复合酶参与大枣多糖提取工艺，讨论以多糖得率、多糖纯度为指标的单因素试验条件，并进一步研究以酶浓度、温度、加酶pH为因素的三因素三水平正

3、交试验，分析试验结果以及各因素的影响和原因，最终产品多糖得率为4，85％，多糖纯度为46．46％，。最后，对大枣渣膳食纤维进行分析、检测，确定大枣渣膳食纤维脱色最佳条件，为实现大枣渣变废为宝、减少环境污染、综合利用大枣渣提供依据。大枣多糖的药理试验以及药理分析充分表明：本试验产品一大枣多糖属无毒级；对小鼠sm肉瘤实体型肿瘤有抑制作用；大枣多糖大、中剂量组对S。。实体瘤小鼠巨噬细胞吞噬率有显著提高作用。关键词：大枣多糖提取酸性蛋白复合酶中性蛋白复合酶大枣渣中图分类号：西北大学学位论文知识产权声明书Y8938二7本人完全了解学校有关

4、保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属于西北大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时，本人保证，毕业后结合学位论文研究课题再撰写的文章一律注明作者单位为西北大学。保密论文待解密后适用本声明。学位论文作者签名：冱亟指导教师签名：堡歪加占年6月’’日纱多年／月日西北大学学位论文独创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下进

5、行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西北大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：影畚^一；年多月’7日及理化性质、免疫学、药理学及应用等。(一)多糖疫苗结构简单的多糖，如淀粉等在体内无抗原性，但结构较复杂的多糖往往有抗原性，细菌的细胞壁或荚膜中含有多种具有种属特异性的多糖，他们是细菌的抗原决定基，利用这一性质可以制备相应的多糖疫苗

6、。目前在临床上应用的主要有预防脑炎的MeningococcalAc型多糖疫苗和AcY—w135型疫苗、肺炎链球菌，(streptococcuspneumoniae)多糖疫苗、流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzae)Hib多糖疫苗(PRP)，正在研究中的包括B型链球菌(streptococcusagalactiae)及伤寒沙门菌(Salmonellatyphi)多糖疫苗。(二)抗肿瘤和免疫促进活性抗肿瘤多糖从结构来看，包括均多糖、杂多糖、肽聚糖以及多糖衍生物或复合物，以高等真菌细胞壁中的B—D一葡聚糖活性最显著，

7、其中香菇多糖、裂褶菌多糖、云芝多糖K已应用于癌症的免疫治疗。多糖类药物能刺激机体的各种免疫活性细胞的成熟、分化和繁殖，使机体免疫系统恢复平衡，从而消除、吞噬癌细胞。多糖对机体细胞无直接细胞毒作用，这是它不同于其它抗肿瘤药的优点之一。多糖具有多方面的免疫调节活性，如促进网状内皮系统的吞噬功能，增强天然杀伤性细胞的活性，活化巨噬细胞，诱导免疫调节因子的表达。多糖的免疫促进作用与抗肿瘤活性有密切的关系，因为抗肿瘤活性多糖是通过提高机体免疫功能而发挥作用，但二者也有不同之处，它们之间的关系还有待深入研究。(三)抗病毒活性早在20世纪70

8、年代就发现有些多糖或衍生物具有抗病毒作用，80年代后期发现某些多糖对艾滋病病毒(HIV)同样具有抑制作用，这些多糖大都含有硫酸基。以抗HIV活性为例，现在已知道硫酸化多糖可以在3个方面产生抗病毒作用：①硫酸化多糖可与T细胞表面的病毒结合位点(CD4受体)结合，干