cd4+ cd25+ foxp3+及cd4+ cd25

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1、CD4+CD25+Foxp3+及CD4+CD25】目的分析小鼠脾细胞中cd4+cd25+foxp3+及cd4+cd25-foxp3+调节性t细胞随小鼠年龄增长的变化,探讨调节性t细胞与衰老的关系。方法2个月(青年)、6个月(中年)和15个月(老年)小鼠各5只，无菌取脾脏制备单个脾细胞悬液，首先用pecy5cd4抗体和fitccd25抗体进行细胞表面染色，pbs洗涤后，经打孔液和固定液处理，最后用pefoxp3抗体进行核内染色，并用流式细胞仪检测cd4+调节性t细胞的变化。结果脾脏中cd4+t细胞的数量在不同年龄小鼠间变化不大，cd4+t细胞中c

2、d4+cd25+t细胞的数量也无明显改变，但随小鼠年龄的增长cd4+foxp3+t细胞的数量明显升高，15个月小鼠cd4+foxp3+t数量高达（16.83±0.44）%，明显高于2个月和6个月小鼠（p＜0.01）。随着年龄的增长cd25+foxp3+调节性t细胞数量逐渐减低，cd25+foxp3+t细胞在15个月和6个月小鼠脾细胞中的数量明显低于2个月小鼠（p＜0.05）；而cd25-foxp3+调节性t瞎胞的数量随着年龄的增长持续升高(p＜0.01)；随着年龄的增长小鼠脾细胞中cd4+cd25+foxp3+t细胞与cd4+cd25-foxp3+t

3、细胞的比值呈下降趋势。结论小鼠衰老过程中cd4+cd25+foxp3+t细胞的数量明显下降，而cd4+cd25-foxp3+t细胞的数量明显上升，提示这两群调节性t细胞亚群在小鼠衰老中可能发挥不同作用。.133229.【关键词】cd4+cd25+foxp3+t细胞cd4+cd25-foxp3+t细胞衰老小鼠gaoqi,matian,zhangxia,jiangyang,zhanglining(instituteofimmunology,schoolofmedicine,shandonguniversity,jinan250012,china)toe

4、xploretherelationshipbetethods15miceonth(young),the6month(middleaged)andthe15month(aged)groups.splenocytesuspensionsarksetry.resultstheproportionofcd4+tcellsandcd4+cd25+/cd4+tcellsinsplenocyteshadnosignificantdifferencesamongthethreegroups.buttheproportionofcd4+foxp3+tcellsi

5、ce,iddleagedmice（p＜0.01）,andtheproportionofcd25+foxp3+regulatorytcellsgraduallydecreased.theproportionofcd25+foxp3+tcellsintheagedgrouporinmiddleagedmiceice（p＜0.05）.hoiceiddleagedmice(p＜0.01),andthatinmiddleagedmiceice(p＜0.01).inaddition,theratioofcd4+cd25+foxp3+ttocd4+cd25

6、-foxp3+tcellsshoetry调节性t细胞（regulatorytcell,treg）是能抑制其他免疫细胞活化、增殖的一群细胞，在维持自身内环境的稳定、防止自身免疫性疾病的发生、抑制移植排斥反应等疾病中发挥重要的保护作用。目前对其特性了解最多的是cd4+cd25+foxp3+调节性t细胞，它们数量和功能的降低与移植排斥反应和多种自身免疫性疾病的发生有关，其数量的升高成为肿瘤免疫耐受的重要机制，然而，对于cd4+cd25+foxp3+调节性t细胞与衰老的关系的报道较少。另外，机体内尚有cd4+cd25-foxp3+调节性t细胞的存在，它们与疾

7、病的关系，特别是与衰老的关系尚不清楚。本研究分析cd4+cd25+foxp3+和cd4+cd25-foxp3+两群调节性t细胞在不同鼠龄小鼠的变化规律，为研究不同调节性t细胞亚群与衰老的关系提供试验依据。1材料与方法1.1材料1.1.1动物15只健康雄性c57bl/6小鼠购于山东大学实验动物中心，其中鼠龄2个月（青年）、6个月（中年）和15个月小鼠（老年）各5只，均在清洁级环境下喂养。1.1.2试剂pecy5标记的抗小鼠cd4（pecy5cd4）抗体、fitc标记的抗小鼠cd25（fitccd25）抗体购于bdbioscience公司，pe标记的

8、抗小鼠foxp3（pefoxp3）抗体、核内染色用打孔液和固定液均购于ebioscience公司，mcco