cd4+、cd25+调节性t细胞在重型乙型肝炎发

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1、CD4+、CD25+调节性T细胞在重型乙型肝炎发【摘要】目的探讨CD4+、CD25+调节性T细胞(CD4+、CD25+Tr)在重型乙型肝炎病人发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测重型乙型肝炎病人及对照组外周血CD4+、CD25+Tr的水平及应用PCR测定重型乙型肝炎病人及对照组外周血中HBVDNA滴度。结果重型乙型肝炎组外周血CD4+、CD25+Tr的百分率为(2.63±0.83)%，较慢性乙型肝炎组的（4.15±1.17）%差异有显著性（P<0．05），较无症状HBV携带者组及健康对照组差异有非常显著性（P均<0．01）；重型乙型肝炎组外周血HBVDNA滴度为1.2×1

2、04copies/ml，较慢性乙型肝炎组(2.3×106copies/ml)和无症状HBV携带者(7.8×105copies/ml)差异有非常显著性（P均<0．01）；不同乙型肝炎病人外周血CD4+、CD25+Tr的百分率与HBVＤＮＡ滴度正相关。结论CD4+、CD25+Tr能抑制T细胞对HBV的免疫反应；重型乙型肝炎患者发病与CD4+、CD25+Tr表达过低有关。【关键词】CD4+、CD25+调节性T细胞重型乙型肝炎CD8+T细胞反应　　【Abstract】ObjectiveToexplorethepossibleroleofCD4＋、CD25＋regulatoryTcellsi

3、nthepathogenesisofseverehepatitisB.MethodsThefrequencyofCD4＋、CD25＋Trintheperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)fromhepatitisBpatientsandhealthycontrolsetryandtheirHBVDNAserumlevelsean%,2.63±0.83)ean%,4.15±1.17,P<0.05),chronicasymptomaticHBVcarriers(P<0.01)andhealthycontrols(P<0.01)2.Ther

4、elevelsofSeverehepatitisBpatients(1.2×104copies/ml)l，P<0.01),chronicasymptomaticHBVcarriers(7.8×105copies/ml，P<0.01)3.CorrelationanalysissholevelsandthefrequencyofCD4＋、CD25＋TrinPBMCsinhepatitisBpatients.ConclusionsCD4＋、CD25＋TrcouldsuppressTcellresponseagainsthepatitisBvirusandthelol肘静脉血二份，E

5、DTA抗凝，分别送往流式细胞仪室和PCR室。CD4+、CD25+Tr测定：取专用试管2支，分别加入IgG-FITC、IgG-PE、IgG-PercpCD45、CD25-FITC、CD4-PE、CD45Percp(上述试剂购自美国Caltag公司)各5ml，立即加入EDTA抗凝血100μl并充分混匀后，室温（20℃～25℃）避光放置15min，每管加溶血剂2ml，充分混匀后，室温（20℃～25℃）避光放置10min，离心弃上清液，用PBS洗涤2次后，加入PBS0.5ml（4℃）待测。24h内用流式细胞仪（美国BECTONDICKINSON公司生产）检测，采用CellQuest软件获取数据和

6、分析，以CD45-SS设门，分析门内CD4+、CD25+细胞亚群，结果以CD4+、CD25+胞占CD4+、细胞的百分率来表示。HBVDNA测定：由江西医学院一附院PCR室检测，操作规程相对固定。　　1.3统计学处理　　采用SPSS10.0统计软件，以(x±s)表示，进行t检验和直线相关分析。以P＜0.05为差异有显著性。　　2结果　　2.1CD4+、CD25+Tr分布情况比较　　重型乙型肝炎组外周血的CD4+、CD25+Tr占CD４＋T细胞百分率为(2.63±0.83)%，较慢性乙型肝炎组的（4.15±1.17）%差异有显著性（P<0.05），比无症状HBV携带者组的(8.32±2

7、.72)%及健康对照组的(8.10±2.65)%，差异均有非常显著性（P均<0.01）。　　2.2血清HBVDNA的水平比较　　重型乙型肝炎组外周血HBVDNA滴度1.2×104copies/ml，较慢性乙型肝炎组的2.3×106copies/ml和无症状HBV携带者组的7.8×105copies/ml差异均有非常显著性（P均<0.01）。　　2.3CD4+、CD25+Tr百分率与HBVＤＮＡ滴度相关分析　　无症状HBV