九牛胆提取物的抗氧化活性研究

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1、九牛胆提取物的抗氧化活性研宄【摘要】目的:研究九牛胆提取物的体外抗氧化活性。方法:采用紫外分光光度法,以VC为对照品,测定九牛胆不同溶剂提取物对DPPH、羟基自由基和ABTS自由基的清除能力。结果:九牛胆不同溶剂提取物对三种自由基均具有一定清除作用,九牛胆甲醇提取物对DPPH和羟基自由基的抑制较强,其IC50为别0.61g/L和0.41g/L。结论:九牛胆甲醇提取物是一种较好的天然抗氧化剂。【关键词】九牛胆;抗氧化活性;紫外分光光度法【中图分类号】R285.5【文献标志码】A【文章编号】1007-8517(2

2、016)12-0035-02Abstract:ObjectiveTheaimofthisstudyistoinvestigatetheantioxidantactivityinvitroofdifferentextractfromtheTinosporasagittata(oliv.)Gagnep..MethodsUVspectrophotometricmethodwasusedtothescavengingcapacitiesofdifferentextractfromtheTinosporasagitta

3、ta(oliv.)Gagnep.onDPPH,?OHandABTS+?wereassayedincontrastwithVC.ResultsTheexperimentalresultsindicatedthatmethanolextracthaseffectofscavengingonDPPHand?OH,theIC50were0.61g/Land0.41g/Lrespectively.ConclusionMethanolextractisagoodnaturalantioxidant.Keywords:Ti

4、nosporasagittata(oliv.)Gagnep.;antioxidantactivity;extract自由基医学领域的深入研宄,使人们越来越关注各种自由基对人体的损伤,从自然界中寻找对自由基具有较强清除能力的天然植物具有重要意义[1]。九牛胆为防己科植物青牛胆Tinosporasagittata(Oliv.)Gagnep.或金果榄T.capillipesGagnep.的干燥块根[2],具有清热解毒、利咽止痛之功效,临床应用治疗咽喉肿痛、痈疽疔毒、泄泻、痢疾、脘腹热痛等,具有重要的经济价值[3-4

5、]。研宄采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、水为溶剂,对九牛胆进行提取,对提取物的体外抗氧化活性进行研宄,对开发利用九牛胆丰富的药物资源提供参考数据。1仪器与材料1.1仪器ABL-224型电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司);DFD-700型电子恒温水浴锅、DZ-2BCII型真空干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);759型紫外可见分光光度计(上海仪电分析仪器有限责任公司)。1.2材料九牛胆购买于贵阳中药市场;对氨基苯礦酸、2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻哇啉-6-磺酸)二铵盐

6、(ABTS)、1,1-二苯基苦基笨肼(DPPH)均购于上海晶纯生化科技股份有限公司;乙醇、硫酸亚铁、水杨酸、高硫酸钾、双氧水(30%)、盐酸、L-抗坏血酸(VC)均为分析纯。2方法2.1九牛胆提取物的制备称取lO.Og干燥的九牛胆粉末,按固液比1:10的比例加入100ml蒸馏水,60恒温水浴回流3h后,过滤。滤液用旋转蒸发仪减压蒸馏,回收溶剂,残留物低温真空干燥,得九牛胆水提取物。同法制备甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿提取物。提取物4°C冰箱保存备用。2.2DPPH自由基清除率的测定[5]分别移取浓度为(0.15

7、、0.3、0.6、1.2、2.4g/L)的样品溶液和物质的量浓度为2X10-4mol/L的DPPH溶液。分别移取2ml不同浓度的样品溶液与2ml的DPPH溶液于具塞试管中,混匀,在30°C下恒温30min,在525nm处测定其吸光度,同时以VC为对照品。其清除率的计算公式:清除率=[1-(Ai-Aj)/Ac]X100%。其中,Ai为样品与DPPH混合溶液的吸光度,Aj为样品溶液的吸光度,Ac为DPPH溶液的吸光度。2.3羟基自由基清除率的测定[6]分别移取1ml不同浓度(0.15、0.3、0.6、1.2、2.

8、4g/L)的样品溶液于10ml具塞试管中,向各试管中加入9mmol/L的硫酸亚铁溶液lml,9mmol/L的水杨酸-乙醇溶液ImL,用蒸馈水定容至5ml,然后分别加入lml6mmol/L的H2O2溶液,启动反应,置于37°C温度下反应lOmin,在510nm下测定其吸光度,以VC为对照品。其清除率的计算公式:清除率=[1-(Ai-Aj)/Ac]XI00%o其中,Ai为加入样品溶液、硫酸亚铁、水杨酸-

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