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1、大酱提取物的抗氧化活性研究摘要：文章主要采用浸提法，利用乙醇和水提取大酱中的抗氧化成分，分别采用Smirnoff法和邻苯三酚口氧化法对大酱浸提成分进行清除自由基作用测定。结果表明大酱中的各抗氧化成分对•011和（）2-•都有清除作用，并随着该成分质量浓度的增加而增强。关键词：大酱；抗氧化；提取；自由基中图分类号：TS247文献标识码：A文章编号：1674-0432（2012）-10-0061-2大酱是以豆类为主加工而成的食品，大豆中的功能性成分可以预防人体的氧化作用：防止细胞膜屮多元不饱和脂质被氧化、屮和自由基的产生、减少自由基的产生、帮助体内抗氧化酶的生成[1],同时还能
2、够强化人体组织功能：抗老化增加人体免疫力、增强新陈代谢功能、降低患癌症几率、强化淋巴组织功能、抵抗过氧化能力，对人体健康有至关重要的作用[1-2]o大酱营养价值高，但人们対英功能性认知少。所以木文通过试验分析得出大酱乙醇提取最佳浸提条件并初步判定其提取成分的抗氧化活性，为大酱功能性在抗氧化方面的研究提供技术基础和理论依据。1材料与方法1.1材料大酱（产自吉林省环春常氏大酱厂）。仪器：数显恒温水浴锅：（HH-6,常州华普达）；电子天平：（FA/JA,上海精密）；UV-U800型可见紫外-分光光度计；电热鼓风干燥箱：（01-A,天津实验仪器厂）；旋转蒸发仪:（SB-2000,上
3、海爱潮）；高速分散均质机：（FJ-200,上海标本）等。分析试剂：FeS04、水杨酸、邻苯三酚、三（轻甲基）氨基甲烷、磷酸二氢钠等（以上均为分析纯试剂）。1.2大酱提取分离工艺流程参考大豆中油脂的提取与淡豆豉中功能性成分的提取方案[3-5],确定本试验浸提的工艺流程如下：干燥一粉碎一筛选一称量一醇溶一均质一浸提一静置抽滤〜脱色一过滤一减压蒸馅一干燥一称量一定容。1.2.1大酱干燥、粉碎、筛选、称量将大酱样品平铺在托盘底部，放入干燥箱内（50°C）5h,通风。取出后用研钵磨碎后再次平铺于托盘底部，放入干燥箱内（50°C）20h,通风。再次取出用研钵磨碎后，以100目筛网筛选，
4、称取10g（精确到0.001位）。1.2.2大酱的乙醇浸提将取出的样品溶于70%乙醇溶液后，进行均质，再浸提时间5h,浸提温度52°C,料液比为1：25的条件下浸提。1.2.3静置抽滤将浸提后的样品进行抽滤，并量取定量的70%乙醇溶液进行清洗，再抽滤，所得滤液备用。1.2.4样晶的脱色减压蒸憾、称量、计算得率、定容结合大酱主要抗氧化成分的性质，采用对大豆异黄酮脱色工艺对木试验样品进行脱色，将抽滤后的提取液加入活性炭（料液比1：10）,加热70°C脱色，趁热过滤。虑后在旋转蒸发仪中减压蒸徭，称量记录，计算得率。并取相应重量溶解于以70%乙醇溶液定容至50mL容量瓶中，备用。1
5、.3大酱提取物对疑基自由基清除作用的测定参照Fenton反应［6］,利用H202与Fe2+混合产生•0H,但•0H存活时间短，所以我们在体系内加入水杨酸捕捉・0H,捕捉后的产物在510nm下有强吸收。若在体系中加入抗氧化物质，便会抑制产物的生成。在固定反应时间的前提下,向相同的反应体系(8.8mmol/L的H202溶液2mL,9mmol/L的FeS()4溶液2mL,9mol/L的水杨酸-乙醇溶液2mL)加入不同浓度的大酱浸提物溶液2讥。最后加H202开始反应，37°C反应0.5h,以蒸憾水为参比，与试剂的空白液做比对。计算公式为：清除率(%)二［1-(Ax-AxO)/AO］
6、X100%式中:A0为空白对照液的吸光度;Ax为加入样品溶液后的吸光度；Axo为不加显色剂H202样品溶液本底的吸光度。1.4大酱提取成分对超氧阴离子自由基清除的试验采用邻苯三酚自氧化法测定［7］。取0.05mol/LTris-Hcl缓冲液(pH=8.2)4.5mL,置于20°C水浴屮预热20min,分别加入lmL不同浓度的试样和0.4mL>25mmol/L邻苯三酚溶液，混匀后于25°C水浴中反应4min加入1n)L8mol/LHcl终止反应，299nm处测定吸光度A,空白对照组以相同体积的蒸馆水代替样品。做3次平行试验，取其平均值。计算公式为:清除率(%)：P二(AO-A
7、i)/AOX100%式屮：A0：空白吸光度；Ai：样詁吸光度。2实验结果2.1大酱提取成分对径基口山基清除能力的评价表1大酱提取物对轻基自由基清除率注:清除率标准曲线：Y二6.128x-0.442,R2=0.9506,IC50=8.23mg/mL1.2大酱提取成分対超氧阴离子自由基的抑制作用表2大酱提取物对超氧阴离子自由基清除率注:清除率标准曲线:Y=5.5608x-21.93,R2二0.9484,IC50=12.93mg/mL3分析和讨论实验结果表明，大酱提取物对•疑自由基、超氧阴离子自由基均有一定的清除效果。大
