仙茅提取物体外抗氧化活性研究

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1、仙茅提取物体外抗氧化活性研究作者：张振东吴兰芳景永帅杨娟【摘要】目的探讨仙茅提取物的抗氧化活性。方法先用80%乙醇，然后用蒸馏水对仙茅进行提取，其中醇提浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取；水提部分经醇沉，制备仙茅粗多糖。分别观察仙茅各提取物对羟基自由基（·OH）、1,1二苯基2苦基苯肼自由基(DPPH·)的清除率以及对Fe3+还原力。结果与抗坏血酸比较，仙茅提取物对自由基均有较强清除作用，对·OH的清除率乙酸乙酯萃取物＞正丁醇萃取物＞粗多糖＞总醇提物，IC50值分别为0.247、0.358、0.7

2、96和0.871mg/ml；对DPPH·的清除率乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>总醇萃取物>氯仿萃取物>石油醚萃取物>粗多糖，其IC50值分别为0.026、0.055、0.620、0.071、0.122和0.275mg/ml。不同提取物对Fe3+有较强还原能力，还原力大小为：乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>总醇提物>氯仿萃取物>石油醚萃取物>粗多糖。结论仙茅具有明显的抗氧化活性，在抗衰老方面有广泛的应用前景。【关键词】仙茅；抗氧化能力；清除自由基；还原力【A

3、bstract】ObjectiveTostudyonantioxidantactivitiesofextractsfromCurculigoorchioideinvitro.MethodsCurculigoorchioidesether,chloroform,ethylacetate,nbutanol.Atthesametime,crudepolysaccharideextract>petroleumetherextract>polysaccharide,andthecorrespondingIC5

4、0valuesg/ml,respectively.DifferentextractshadstrongdeoxidizationabilityofFe3+,theactivitiessequenceextract>petroleumetherextract>polysaccharide.ConclusionsCurculigoorchioideshavestrongerantioxidativeactivitiesand处有最大吸收。取醇提部分萃取物各50mg，用无水乙醇定容至25ml；取粗多糖50m

5、g，用蒸馏水定容至25ml，配制成质量浓度为2mg/ml，再以该质量浓度溶液配制成所需浓度。加入一定浓度样品4ml，9mmol/LFeSO40.5ml，9mmol/L水杨酸0.5ml，8.8mmol/LH2O20.5ml，混匀，于37℃水浴中加热30min，510nm测定样品吸光度（Ai）。将体系中的样品改为加入4ml蒸馏水，测定得空白对照吸光度（Ao），向体系中加入0.5ml蒸馏水代替8.8mmol/LH2O2，测定得样品本底吸光度（Aj），其中样品吸光度（Ai）每个质量浓度做3个平行，取平均值，以Vc作阳性对

6、照，按下式计算清除率：K(%)=〔Ao-(Ai-Aj)〕/Ao×100。　　1.4.2清除DPPH·〔10〕　　DPPH·是一种稳定的自由基，在有机溶剂中呈紫色，在517nm处有较大吸收，当加入抗氧化剂一部分自由基被清除掉，使该波长下吸收强度减弱，可借此来评价某物质的抗氧化活性。取醇提部分萃取物各50mg，分别用无水乙醇溶解并定容至25ml；取粗多糖50mg，蒸馏水定容至25ml，配制成质量浓度为2mg/ml样品，再以该质量浓度配制成所需浓度。以无水乙醇配制0.16mmol/LDPPH·溶液，置于棕色容量瓶中。取

7、3ml样品溶液加入3mlDPPH·溶液于25℃水浴中加热15min后，在517nm测得试样吸光度（Ai），取3ml蒸馏水代替样品测得空白吸光度（Ao），以3ml样品中加入3ml蒸馏水测得样品本底吸光度（Aj），其中（Ai）每个样品质量浓度做3个平行，取平均值。以Vc作阳性对照，按下式计算清除率：K(%)=〔Ao(AiAj)〕/Ao×100。　　1.4.3Fe3+还原力实验测定〔11〕　　取2.5ml不同质量浓度的样品溶液，加入0.2mol/L，pH6.6磷酸缓冲液2.5ml及1%铁氰化钾2.5ml，50℃水浴

8、反应20min后急速冷却，加入10%三氟乙酸溶液2.5ml混匀，0.2μm水相滤膜过滤，取上清液5ml，加入0.02%三氯化铁溶液5ml，10min后立即于700nm处测定吸光值。吸光值越大则还原能力越大，以Vc作为对照。　　1.5统计学处理　　采用SPSS17.0统计分析软件，进行回归、Probit分析，选取可信度为95%，计算IC50。　　2结果　　2.1对·OH的清