楮实提取物体外抗氧化活性的研究

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1、楮实提取物体外抗氧化活性的研究作者：吴兰芳张振东景永帅杨娟【摘要】目的探讨楮实提取物的体外抗氧化活性。方法先用80%乙醇，然后用蒸馏水对楮实进行提取。其中醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，水提部分经醇沉、干燥后得到楮实粗多糖。运用羟基（·OH）自由基体系、二苯代苦味基肼（DPPH·）自由基体系和对Fe3+的还原能力实验，比较楮实各提取物的抗氧化活性。结果楮实提取物对·OH自由基和DPPH·自由基均有较好的清除作用，其中总醇提取物对·OH自由基的清除能力最强，其IC50值为0.28mg/ml；乙酸乙酯提取物对DPPH·自由基的清除效果最好，其IC5

2、0值达到0.08mg/ml；各提取物对Fe3+均有较强的还原能力，乙酸乙酯提取物还原效果最为明显。结论楮实提取物具有一定的抗氧化活性，在抗衰老方面有广泛的应用前景。【关键词】楮实；抗氧化活性；清除自由基；还原力【Abstract】ObjectiveTostudytheantioxidantactivitiesofextractsfromBroussoiapapyriferainvitro.MethodsB.papyriferaether,chloroform,ethylacetate,nbutanol.Atthesametime,crudepolysaccha

3、ride.ResultsTheextractsfromB.papyriferahadgoodscavengingeffectonthehydroxylfreeradicalandDPPHfreeradical.Ethanolextracthadthebestscavengingeffectonhydroxylfreeradicalsystem,g/ml.EthylacetateextactshadthebestscavengingeffectonDPPHfreeradical,g/ml.Alloftheextractshadstrongdeoxidization

4、abilityofFe3+.Amongofthem,ethylacetateextractshadsignificantdeoxidizationability.ConclusionsBroussoiapapyriferahasstrongerantioxidantactivitiesand处有最大吸收。取各萃取物50mg，用无水乙醇溶解并定容至25ml；取粗多糖50mg用蒸馏水溶解，定容至25ml，配制得2mg/ml的各样品质量浓度，再以该质量浓度配制成所需浓度。依次加入样品4ml，9mmol/LFeSO40.5ml，9mmol/L水杨酸0.5ml，8.8mm

5、ol/LH2O20.5ml。该体系于37℃水浴中加热30min，于510nm处测定样品吸光度（Ai）。用4ml蒸馏水代替体系中的样品，测定得空白吸光度（A0）。向体系中加入蒸馏水0.5ml代替8.8mmol/LH2O2，测定样品本底吸光度（Aj）。每个质量浓度样品做3个平行，取其平均值，以Vc作阳性对照，按下式计算清除率：K(%)=〔A0-(Ai-Aj)〕/A0×100。　　1.4.2清除DPPH·自由基〔8〕　　DPPH·自由基是一种稳定的自由基，在有机溶剂中呈紫色，在517nm波长有较大吸收，当加入抗氧化剂一部分自由基被清除，使得在该波长下吸收减弱，可借此来

6、评价物质的抗氧化活性。取各萃取物50mg，用无水乙醇溶解并定容至25ml；取粗多糖50mg，用蒸馏水溶解并定容至25ml，配制得2mg/ml的各样品质量浓度，再以该质量浓度配制成所需浓度；以无水乙醇配制0.16mmol/LDPPH·溶液，避光保存。取3ml待测样品溶液加入3mlDPPH·溶液于25℃水浴中加热15min，在517nm测得试样吸光度（Ai）。取3ml蒸馏水代替样品测得空白吸光度（A0）。向3ml样品中加入3ml蒸馏水测得样品本底吸光度（Aj），每个质量浓度样品做3个平行，取平均值。以Vc作阳性对照，按下式计算清除率：K(%)=〔A0-(Ai-Aj)

7、〕/A0×100。　　1.4.3Fe3+还原能力测定〔9〕　　取2.5ml不同质量浓度的样品乙醇溶液，加入0.2mol/L磷酸缓冲液2.5ml及1%铁氰化钾2.5ml，50℃水浴反应20min后急速冷却，加入10%三氟乙酸溶液2.5ml混匀，4000r/min离心10min，取上清液5ml，加入4ml蒸馏水及0.1%FeCl31ml，10min后于700nm处测定吸光值。以Vc作为阳性对照。　　2结果　　2.1对·OH自由基的清除作用　　由图1可以看出，大部分提取物对·OH自由基都表现出一定程度的清除能力，并在实验浓度范围内呈明显的量效关系，但各部分提取物的清除

8、能力都弱于Vc。清除能力