胰十二指肠切除术后肠黏膜屏障损伤及sirs与肠道细菌移位关系

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1、胰十二指肠切除术后肠黏膜屏障损伤及SIRS与肠道细菌移位的关系[摘要]目的探讨胰十二指肠切除术后肠黏膜屏障损伤与肠道细菌移位的关系。方法将50例行胰十二指肠切除术患者术前及术后24、48、72h检验全血细菌dna、血浆d—乳酸和内毒素水平与空白对照组比较。结果术前所有患者细菌dnapcr结果均为阴性，术后72h内pcr检测阳性10例（20.00%），术后sirs组与无sirs组差异有统计学意义（p0.05），病例组术后各时段血浆d—乳酸和内毒素均显著高于术前（p0.05），theplasmad—lactateandendotoxininthecasegroupatvariousti

2、meintervalsafterweresignificantlyhigherthanpreoperative（p0.05），有可比性。1.2方法1.2.1标本取样空白对照组于检验日清晨，患者于术前及术后24、48、72h在无菌条件下抽取空腹外周静脉血10ml置于无菌的乙二胺四乙酸二钠抗凝管，于4℃采用2000r/min，离心10min，分装成1.5ml试管于—80℃存储备检。1.2.2试剂与仪器右旋乳酸脱氢酶、d—乳酸检测试剂盒购自美国sigma公司；biospin全血基因组dna提取试剂盒，pcr扩增试剂盒购自北京博迈斯生物科技有限公司；内毒素测定试剂盒购自北京博迈斯生物科技有

3、限公司；德国eppendorf紫外可见光分光光度计；德国eppendorf5804r离心机。1.2.3实验室检测所有受试者全血标本采用酶学分光光度法检测血浆d—乳酸，标准曲线范围：（3.125～50）mg/l；采用鲎实验法测定血浆内毒素。1.2.4全血微生物dna提取以大肠杆菌特异性β半乳糖苷酶基因的bg—1、bg—4及细菌共有的16srrna基因的16srrna+、16srrna﹣为靶基因。bg—1引物序列为：5’—ctttgcctggtttccggcaccagaa—3’（201—225）；bg—4引物序列为：5’—aaccaccgcacgatagagattcggg—3’（963

4、～939）；16srrna+引物序列为：5’—ggactaccagggtatctaat—3’（806—787）；16srrna﹣引物序列为：5’—ggactaccagggtatctaat—3’（484～504），进行pcr扩增。1.3诊断标准[4]sirs诊断：术后体温>38℃；心率>90次/min；呼吸>20次/min，paco212.0×109/l或未成熟粒细胞>10%。具备以上2项或2项以上者可诊断为sirs。1.4统计学处理数据采用spss17.0进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验或方差分析，直线相关性采用pearson直

5、线系数分析，p0.05），病例组术后各时段血浆d—乳酸和内毒素均显著高于术前，手术24h最高，后呈下降趋势（p<0.05），胰十二指肠切除术后患者血浆d—乳酸和内毒素呈正相关（r=0.823，p<0.05），胰十二指肠切除术后存在明显的肠道细菌移位情况，见表1。2.2细菌dnapcr检测结果术前所有患者细菌dnapcr结果均为阴性，术后72h内pcr检测阳性10例（20.00%），其中24、48、72h分别为4例次、8例次、8例次，各时段均检出bg和16srrna阳性，bg略低于16srrna。术后sirs17例（34.00%），其中pcr阳性8例，占47.06%，无sirs感染患

6、者33例，其中pcr阳性2例，占6.06%，两组差异有统计学意义（χ2=12.845，p<0.01），见表2。表2胰十二指肠切除术全血细菌dnapcr检测结果注：与无sirs组比较具有统计学意义（χ2=12.845，*p<0.01）2.3细菌dnapcr及sirs与血浆d—乳酸和内毒素的关系pcr阳性组血浆d—乳酸和内毒素显著高于pcr阴性组（p<0.01），sirs组血浆d—乳酸和内毒素显著高于无sirs组（p<0.01），pcr阳性、sirs与胰十二指肠切除术后肠黏膜屏障损伤密切相关，见表3。表3患者细菌dnapcr及sirs与血浆d—乳酸和内毒素的关系（x±s）注：t1为pc

7、r阳性组和pcr阴性组比较；t2为sirs组与无sirs组比较3讨论肠道手术会导致肠道失血，肠绒毛缺血、缺氧而形成缺血性损害，再灌注后大量的前列环素、前列腺素、白三烯等血管因子会使肠道微血管频繁收缩和舒张，氧自由基、c反应蛋白等因子会导致血管内皮损伤，从而使肠道血管功能受损、通透性增加[2—4]。此外，分泌型iga功能受到抑制，进一步损伤肠黏膜屏障功能，使肠道免疫防御能力下降。肠道内定植细菌透过受损的肠上皮细胞或血管上皮细胞转移至肠周围组织、肠黏膜深处形成肠细菌移位，