fk506对阿苯哒唑脂质体在大鼠体内药代动力学的作用

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1、新疆医科大学医学硕士学位论文代动力学作用，行本动物实验。本研究选用20只健康雄性Wistar大鼠作为实验动物，随机分为两组：阿苯哒唑脂质体组、FK506+阿苯哒唑脂质体组。采用平行设计法：两组按适当剂量口服灌药后，分别在2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h、36h、48h采尾静脉血，停药24小时后，连续灌药五天达到稳态血药浓度后采血。所有血样用HPLC法测定ABZ及其主要代谢产物ABZSX和ABZSN的血药浓度。记录数据行组间对照分析，数据用SPSS17.0统计软件进行处理。对实验结果进行分析得出结论。期望对晚期肝泡状

2、棘球蚴肝移植术后的临床用药予以有益的指导。本课题来源于赵晋明教授的国家自然科研基金课题项目：肝泡状棘球蚴肝移植免疫耐受研究项目中的部分子课题。材料与方法1．材料1.1实验动物取20只健康雄性Wistar大鼠，鼠龄6个月，体重300~350g。试验期间常规喂食水，单独笼养。实验动物由新疆医科大学动物中心提供。1.2主要试剂及药物阿苯达唑标准品、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑砜(Smith&KlineBeehame公司)阿苯达唑脂质体(L-ABZ)由新疆包虫病临床研究所药剂室提供。FK506(胶囊)由日本藤泽(Fujisawa)制药公司生

3、产。1.3实验仪器Waters2695(Alliance)高效液相色谱仪，检测器：Waters2487DualλAbsorbanceDetector，数据采集、处理：Millennium32ChromatographyManager(Ver4.0)，XW-80型旋涡混合器(上海医学院仪器厂)，TGL-16B高速离心机(上海安亭科学仪器厂)2．方法2.1实验分组20只Wistar大鼠采用随即数字表法随机分为两组：阿苯哒唑脂质体组10只，FK506+阿苯哒唑脂质体组10只(以下简称联合组)。2.2给药及标本采取方法依据FDA药物相

4、互作用研究指南(草案)2006版[6]要求采用平行设计法：(1)L-ABZ喂药组：L-ABZ，50mg/kg/d。每日药量分2份，每12小时灌胃一次；(2)联合喂药组：FK506，1mg/kg/d，L-ABZ，50mg/kg/d。每日药量分别分2份，—4—材料与方法每12小时一次灌胃。定时口服灌药后，分别在2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h、36h、48h采尾静脉血，-700C低温保存，血样用HPLC法测定ABZ及其主要代谢产物ABZSX和ABZSN的血药浓度。停药24小时后，连续灌药五天达到稳态血药浓度，采血并处死

5、动物，同时取肝脏、肾脏大体标本肉眼观察有无明显病变。1.1HPLC测定血药浓度的方法2.1标准溶液与内标液的配制阿苯哒唑(ABZ)阿苯哒唑亚砜(ABZSX)阿苯哒唑砜(ABZSN)标准溶液的配置：精密称取干燥恒重的ABZ、ABZSX、ABZSN标准品各10mg，于10ml容量瓶中，加甲酸2ml，振摇溶解后，以色谱级甲醇分别稀释至刻度作为标准储备液，冰箱冷藏备用。甲苯咪唑(MBZ)标准溶液的配制：精密称取干燥恒重MBZ10mg，加甲酸2ml，振摇溶解后，加色谱级甲醇分别稀释至刻度作为内标标准储备液。精密量取标准储备液，适量，用色

6、谱乙酸乙酯稀释至1µg/ml的甲苯咪唑内标应用液，备用。2.2样品的预处理取血浆0.2ml，置1.5ml塑料离心管中，依次加入磷酸缓冲液0.2ml，内标应用液0.5ml，旋涡震荡2min，离心(8000r/min)5min。吸取上清液(有机层)转移至另一离心管中，作为A液。于第一管中再加入乙酸乙酯0.5ml，旋涡震荡2min，离心(8000r/min)5min。吸取上清液(有机层)。吸取上清液与A液合并，50-550C水浴上蒸干，残留物用60ul甲醇重溶，高效液相色谱仪进样30ul。2.3色谱条件色谱柱：3.9×150mm(S

7、ymmetryShieldTMRP18，粒径5μm)；检测波长：292nm；流动相；甲醇：水：乙氰=(20：56：24)；流速：1.0ml/min；进样量：30μl；柱温：25℃。3．测定指标定时取大鼠血样中测定ABZ、ABZSX、ABZSN的血药浓度。4．数据记录及统计学处理实时记录数据。本组资料为重复测量资料，除第48小时两组所有指标浓度数据均低于试剂的最低检出水平外，其余各时间点均有具体数值。处理时对除第48小时时间点以外的各时点组间浓度数据进行重复测量资料的方差分析，关注处理组间的差别是否有统计学意义。研究选取的检验水

8、准α=0.05，双侧，数据用SPSS17.0统计软件进行处理。—5—新疆医科大学医学硕士学位论文结果1．两组间Wistar大鼠血液中的ABZ原型浓度实验中20只小鼠全部存活，数据全部有效，比较两组间ABZ原型的血药浓度无统计学意义(P＜0.05)，见表-1，变化趋势见图-1：