肾小管上皮细胞转分化过程中ilk的表达变化及大黄素对其的干预效应

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1、肾小管上皮细胞转分化过程中ILK的表达变化及大黄素对其的干预效应：陈廷芳,陈明,秦建华,王明勇【摘要】　　目的:研究信号蛋白ILK在IL1β诱导的肾小管上皮细胞肌成纤维细胞转分化(TEMT)中的表达变化以及大黄素是否是通过抑制ILK的表达而影响IL1β诱导的肾小管上皮细胞肌成纤维细胞转分化。方法:以体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞株(NRK52E)为研究对象,分为空白对照组、大黄素对照组、IL1β诱导组、IL1β加大黄素组。在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;免疫双标法检测a平滑肌肌动蛋白（aSMA）和E钙黏连素(Ecadherin)的表达;

2、免疫单染检测ILK的表达;ELISA法测定培养细胞分泌的纤维连接蛋白(FN)含量。结果:IL1β诱导细胞转变为明显类似成纤维细胞形态,增加aSMA的表达［（65.5±1.7）vs（140.4±3.0）,P<0.05］,减少Ecadherin的表达［（82.5±1.0）vs（36.0±2.8）,P<0.05),促进ILK的表达［（36.1±3.1）vs（82.4±1.2）,P<0.05］,促进FN的合成［（54.6±3.1）mg/Lvs（124.8±3.2）mg/L,P<0.05］,加入大黄素后上述变化受到明显抑制。结论:在IL1β

3、诱导的TEMT中ILK的表达是明显上调的,大黄素可能通过下调ILK的表达而抑制IL1β诱导的TEMT。【关键词】白细胞介素1β大黄素ILK转分化　　［Abstract］AIM:ToobservethechangeofILKexpressionininterleukin1β(IL1β)inducedtubularepithelialmyofibroblasttransdifferentiation,andtoinvestigateodininhibitIL1βinducedtubularepithelialmyofibroblasttransdif

4、ferentiationthroughanintergernlinkedkinasedependentmechanism.METHODS:Normalratkidneyepithelialcellline(NRK52E)odincontrolgroup,IL1βinducedgroupandemodininhibitedgroup.A）andEcadherinmunohistochemistrystainingtechnique,munohistochemistrystainingtechnique.Thesecretionoffibronectin（

5、FN）efibroblastlikeinappearance.TheexpressionofaSMAg/L,P<0.05).EmodinmarkedlyinhibitedallofthosechangesinducedbyIL1β.CONCLUSION:TheexpressionofILKisupregulatedinIL1βinducedtubularepithelialmyofibroblasttransdifferentiation.EmodinmightinhibitTEMTbyadoodin;ILK;transdifferentia

6、tion　　肾小管间质纤维化（tubularinterstitialfibrosis,TIF）是各种不同病因所致的慢性肾脏疾病进展至终末期肾功能衰竭（endstagerenaldisease,ESRD）的共同病理途径,其特征为正常的肾小管和肾间质结构被大量聚集的细胞外基质（如I、Ⅲ、Ⅳ型胶原,纤维连接蛋白,层黏蛋白等）所代替。研究认为由肾小管上皮细胞转分化(tubularepithelialmyofibroblasttransdifferentiation,TEMT)成的肌成纤维细胞是肾小管间质纤维化形成中生成细胞外基质的主要细胞［1］。研究发现整合素连接激酶

7、(integrinlinkedkinase,ILK)参与了肾间质纤维化的发生与发展［2］。大黄素可通过影响细胞表型转化,抑制促纤维化因子的合成与分泌,调节细胞外基质合成与降解等机制抗肾间质纤维化［3］。ILK是否参与了TEMT及大黄素是否通过影响ILK的表达而调控TEMT,得我们深入研究,此本实验我们采用对比观察方法,以ILK为切入点进行肾小管上皮细胞肌成纤维细胞转分化机制与干预研究。　　1材料和方法　　1.1材料正常大鼠肾小管上皮细胞株（NRK52E）源于AmericanTypeCultureCollection(ATCC),由四川大学华西医院肾内科惠赠。大

8、黄素购自南京清泽医药科技