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1、姜黄素与依那普利对大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的对比研究论文.freelg/(kg·d)姜黄素、10mg/(kg·d)依那普利腹腔注射。术后第4周,处死各组大鼠,用HE、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度;用免疫组化方法检测肾组织内转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的表达部位及蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠血清尿素氮水平显著增加(P0.01),肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P0.01),肾组织内TGF-β1、α-SMA、Vim
2、entin表达均显著上调(P0.01)。姜黄素或依那普利干预后,上述上调指标都被显著抑制(P0.05或0.01)。两种药物之间比较,作用无显著性差异(P0.05)。结论姜黄素及依那普利可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化而减轻肾间质纤维化。【关键词】姜黄素;依那普利;α-平滑肌肌动蛋白;波形蛋白;肾小管上皮细胞转分化;大鼠Abstract:ObjectiveToparetheeffectsofcurcuminandenalaprilontransdifferentiationofrenaltubular
3、epithelialcellsinunilateralureteralobstruction(UUO)rats.MethodUUOratmodellydividedintofourgroupse-operatedgroup(0.9%salinesolution),.freelodelgroup(dimethylsulphoxide),curcumintreatmentgroupcurcumin100mg/(kg·d),andenalapriltreatmentgroupenalapril10mg/(kg·d)
4、.Medicinesentinmunohistochemistrystaining.Resultparede-operatedgroup,theserumureanitrogenlevelodelgroup(P0.01),theexpressionofTGF-β1、α-SMAandVimentinproteininorenalapril,theup-regulationoftheabove-mentionedparametersinandenalapril(P0.05).ConclusionThepharma
5、cologicaleffectsofcurcuminandenalaprilmaybepartlymediatedbyinhibitingthetransdifferentiationofrenaltubularepithelialcellstoyofibroblastinUUOrats.Keyin;enalapril;α-SMA;vimentin;tubularepithelialtransdifferentiation;rat姜黄素(Curcumin)是从姜科植物姜黄中提取的一种植物多酚,也是姜黄发挥药理
6、作用最重要的活性成分。近年研究表明1-2,姜黄素对多种原因所致的肾损害及糖尿病大鼠肾脏都具有保护作用。在大鼠动物模型中,可明显减轻肺纤维化、肝纤维化程度3-4。但姜黄素能否减轻单侧输尿管梗阻模型(UUO)大鼠肾间质纤维化?其机制是否与抑制肾小管上皮细胞转分化有关?本实验拟用UUO大鼠模型对此做一探讨,并将其与依那普利进行比较。现将结果报道如下。1实验材料1.1主要试剂兔抗大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)多克隆抗体(1∶50)、小鼠抗大鼠α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体(1∶100)、小鼠抗大鼠波
7、形蛋白(Vimentin)单克隆抗体(1∶100)、生物素化山羊抗小鼠IgG,链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物工作液,二甲基邻苯二胺(DAB)显色试剂均购自武汉博士德公司;多聚赖氨酸粘片剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司;姜黄素购自美国Sigma公司。1.2动物6~8周龄清洁级雄性asson染色,光学显微镜(×200)采集Masson染色图像(每只大鼠随机采集15个视野),以多功能彩色病理图像分析系统(山西医科大学)进行自动测量分析,计算肾间质纤维组织相对面积(肾间质绿染区面积/视野总面积×100%)。2
8、.3免疫组化染色采用SABC法进行免疫组化检测。切片常规处理后,用微波处理10min(TGF-β1、α-SMA、Vimentin)修复抗原。分别滴加相应第一抗体,4℃冰箱孵育过夜。然后加入相应生物素化第二抗体,37℃,20min,滴加链酶亲和素-生物素-过氧化物酶,37℃,20min,最后加入DAB显色液,显微镜下控制显色。每次染色用PBS缓冲液代替一抗设立阴性对照。TGF-β1、α-SMA、Vim