肾炎四味片对慢性肾脏病大鼠肾功能保护作用的实验研究课件

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1、肾炎四味片对慢性肾脏病大鼠肾功能保护作用的实验研究河北医科大学第三医院河北省肾脏病研究中心林海英概述肾炎四味片由细梗胡枝子、北京石韦、黄芪、黄芩等药物组成，可活血化瘀，清热解毒，补肾益气之功效。概述胡枝子又名随军茶，其味微苦，性平，具强筋益肾，健脾祛湿，润肺清热、利水通淋之功效，为肾炎四味片的君药之一，含有槲皮素，三叶豆甙等成分，是湖北民间治疗慢性肾炎的有效单方。从中提取的黄酮甙可增加尿素及氯离子的排出，其茎及叶的醇提取物均可作成注射剂而应用于慢性肾炎患者，另外从本属植物中已分离鉴定的化学成分有黄酮、生物碱、三萜、有机酸及甾醇类，药理实验表明其具有抗炎、镇痛、利尿和改善肾功能等作用。概述

2、石苇，味苦，甘，性微寒，有利水通淋、清肺泄热、止血的功能，可用于淋痛，尿血，尿路结石，肾炎浮肿，崩漏，痢疾，肺热咳嗽等症。黄芩系唇形科植物的干燥根，性寒，味苦，具有泻实火，除湿热，止血等作用。概述黄芪，性微温，味甘，具补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌之功效，用于气虚乏力，中气下陷，表虚自汗，气虚水肿，血虚痿黄，内热消渴，慢性肾炎蛋白尿，糖尿病等症。现代药理研究证实，黄芪具有显著的抗氧化活性，并且可通过提高血浆白蛋白水平、调节脂质代谢、促进水钠排泄、改善高凝状态、减轻肾损伤、保护肾功能等作用来治疗肾病。概述本研究应用肾炎四味片对多种慢性肾脏病动物模型进行干预，了解肾炎四味片对肾脏的保护作

3、用及其机制。肾炎四味片对DM大鼠肾脏保护作用的实验研究肾炎四味片对UUO大鼠肾脏肾脏纤维化的影响肾炎四味片对5/6肾切除大鼠肾脏致纤维化因子的影响动物模型的制备第一部分清洁级健康雄性SD大鼠45只（体重200±20g，河北医科大学实验动物中心提供），随机抽取30只腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ），制备DM大鼠模型，余15只注射相当体积的柠檬酸缓冲液做为正常对照组（A组）。48小时后尾静脉采血测定血糖≥16.7mmol/L，试纸法尿糖+++～++++确定为DM大鼠模型。给药方法30只DM大鼠随机分为DM对照组（B组）15只、肾炎四味片干预组（C组）15只。C组给予

4、肾炎四味片(湖北亿雄祥瑞药业有限公司提供)2.16g/kg/d（溶于2ml自来水中）灌胃，每日一次，A、B组仅给予2ml自来水灌胃，连续8～12周。整个实验期间大鼠自由饮食，不使用胰岛素及其它降糖药物。第一部分标本的留取及检测实验开始后8、12周末每组随机取7只大鼠称重、收集24h尿，断头取血，左肾称重后取肾脏上极皮质约1mm3放入4%戊二醛溶液中，取1/4肾组织置于4％多聚甲醛中。AU2700型自动生化分析仪检测：血糖、血肌酐、尿肌酐、24小时尿蛋白定量，计算肌酐清除率，结果用体重校正。常规病理学检查：4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，行HE、PAS和Masson染色；电镜标本采用戊二醛、锇

5、酸双重固定，Epon812环氧树脂包埋，铀-铅双重染色。免疫组织化学检查：采用ABC法。以HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统对TGF-β1和α-SMA表达进行半定量分析，计算阳性面积比。第一部分统计学处理第一部分所有数据用均数±标准差表示，齐性检验后组间差异性比较采用单因素方差分析和t检验，应用SPSS14.0软件包进行分析。结果第一部分Comparisonofbloodglucose、urinevolume、24-hoursurinaryprotein、ratioofkidneytobodyweightandcreatinineclearancerateinallgrou

6、ps▲p<0.01vsgroupA；★p<0.01vsgroupBbyttest结果第一部分ExpressionofTGF-β1andα-SMAinrenalcortexofallgroups▲p<0.01vsgroupA；★p<0.01vsgroupBbyttest结果第一部分groupAatweek12Fig.1consequencebyelectronmicroscopegroupBatweek12groupCatweek12结果第一部分Fig.2ImmunohistochemicalstainingforTGF-β1groupAatweek12groupBatweek12grou

7、pCatweek12结果第一部分Fig.3Immunohistochemicalstainingforα-SMAgroupAatweek12groupBatweek12groupCatweek12结论第一部分肾炎四味片能够减少STZ诱导的糖尿病大鼠24h尿蛋白排泄量，减轻肾小球肥大；下调肾组织TGF-β1和α-SMA的表达，改善肾小球体积增大、基底膜不规则增厚、部分足突融合、系膜区增宽、细胞外基质增多等一系列病理变化；且无降低糖尿病