ifn―γ和il―1在鼻咽血管纤维瘤中的表达及其意义

《ifn―γ和il―1在鼻咽血管纤维瘤中的表达及其意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、IFN-V和IL一1在鼻咽血管纤维瘤中的表达及其意义［摘要］目的检测干扰素(interferon-Y,IFN-Y)和白细胞介素-1(interleukin1,IL-1)在鼻咽血管纤维瘤中的表达水平，探讨IFN-Y和IL-1在鼻咽血管纤维瘤骨质破坏机制中的作用。方法应用免疫组化SP法检测IFN-Y和IL-1在2000〜2012年期间20例鼻咽血管纤维瘤和2015年3〜6月期间10例正常下鼻甲组织中的表迖。结果IFN-Y和IL-1蛋白在JNA中的阳性表迗率均为100%,明显高于IFN-Y和IL-1蛋白在下鼻甲组织中的阳性表迗率20%(P均

2、0.05)。结论IFN-Y和IL-1在鼻咽血管纤维瘤组织中阳性表达率较高，可能是参与鼻咽血管纤维瘤骨质破坏的相关因素。［关键词］干扰素-Y;白细胞介素-1;鼻咽血管纤维瘤；免疫组化［中图分类号］R739.63［文献标识码］A［文章编号］1673-9701(2016)18-0001-03鼻咽血管纤维瘤(juvenilenasopharyngealangiofibroma,JNA)为鼻咽部最常见的良性肿瘤，常发生于10〜25岁的青年男性，由大量的血管、弹性纤维及致密结缔组织组成，Liang等［1］认为其本质是血管错构瘤。虽然JNA是良性肿

3、瘤，但其破坏颅底及周围骨质可导致严重的并发症。JNA破坏颅底骨质进行扩张性生长的机制尚未清楚。最近在研究病理性骨质破坏性疾病中发现IFN-Y和IL-1在胆脂瘤型中耳炎骨质破坏中发挥重要作用［2-4］。JNA的骨质破坏过程与胆脂瘤的骨质破坏过程有许多相似之处，它们都是良性肿瘤，都会破坏颅底骨质进行扩张性生长。本实验拟应用免疫组化染色SP法检测IFN-Y和IL-1在JNA组织中的表迗，探讨其在JNA骨质破坏机制中的作用，现报道如下。1材料与方法1.1材料来源20例鼻咽血管纤维瘤标本来自于2000〜2012年福建医科大学附属第一医院病理科，

4、福建省耳鼻喉研究所石蜡包埋存档蜡块。鼻咽血管纤维瘤组：鼻咽血管纤维瘤患者标本共20例，术后病理诊断均为鼻咽血管纤维瘤，患者年龄11〜35岁，平均18.5岁，其中男20例，女0例。按Metin等［5］的肿瘤分期标准：I期7例，II期6例，III期6例，IV期1例。对照组10例下鼻甲组织术后诊断为下鼻甲慢性炎症，患者年龄18〜40岁，平均25岁，其中男5例，女5例。标本来自2015年3〜6月温州医科大学附属第一医院耳鼻喉_头颈外科，在内窥镜下取鼻中隔偏曲伴下鼻甲肥大患者的下鼻甲组织。标本均是24h内取材，应用4%甲醛固定，常规石蜡包埋，4

5、um厚连续切片。1.2试剂兔抗人IFN-y单克隆抗体购自SANTACRUZ公司和兔抗人IL-1多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。1.3免疫组织化学染色操作严格按照说明书进行，步骤如下：①烤片，68°C,20min；②常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水；二甲苯I20min-二甲苯1120min-100%酒精I10min-100%酒精II10min-95%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min；③阻断灭活内源性过氧化物酶：3%H2O237°C孵育10min,PBS冲洗3X5min；④抗原修复：置0.01M枸橼酸缓冲液（pH

6、6.0）中煮沸（95°C，15〜20min），自然冷却20min以上，再用冷水冲洗缸子，加快冷却至室温，？83冲洗3父5111化；⑤正常羊血清工作液封闭，37°C10min,倾去勿洗；⑥滴加一抗4°C冰箱孵育过夜，PBS冲洗3X5min（用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照）；滴加生物素标记二抗，37°（3孵育30111什，？83冲洗3X5min;⑦滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液，37°C孵育30min，PBS冲洗3X5min;⑧DAB/H202反应染色，自来水充分冲洗后，苏木素复染，常规脱水，透明，干燥，封片。用PBS代替第

7、一抗体作为阴性对照，用已知阳性片做阳性对照。1.4免疫组化结果判断[6]IFN-Y和IL-1的阳性染色者细胞胞浆有棕黄色颗粒沉着，阳性细胞数：0分为无阳性细胞，1分为阳性细胞数75%o染色强度：0分为无染色，1分为弱染色，2分为中等强度染色，3分为强染色。计算各抗体的阳性细胞数和染色强度得分，以3〜7分为阳性。1.5统计学分析应用SPSS13.0统计学软件进行分析，IFN-Y和IL-1阳性表达率采用x2检验或者精确概率法进行比较，P[7]TakayanagiH，SatoK,TakaokaA,etal.Interplaybetweeni

8、nterferonandothercytokinesystemsinbonemetabolism[J].ImmunolRev,2005，208(2):181-193.[8]GaoY，GrassiF，RyanMR.IFN-