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时间:2018-10-16
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1、类号:学校代码:10069120150194密级::学号TIANJINUNIVERSITYOFCOMMERCE硕士学位论文ACE抑制肽YS和INN的构效关系研究ton-SudtheStructureActivityRelationshiofACEInhibitorypyPetidesYSandINNp研究生:王晓丹.专业名称:食品科学指导教师:薛璐副教授2018年5月分类号:学校代码:10069密级:研究生学号:120150194ACE抑制肽YS和INN的构效关系研究Studyonth
2、eStructure-ActivityRelationshipofACEInhibitoryPeptidesYSandINN研究生姓名:王晓丹专业名称:食品科学指导教师姓名:薛璐副教授论文提交日期:2018年5月学位授予单位:天津商业大学独创性声明及使用授权声明一、学位论文独创性声明本人所撰写的学位论文是在指导教师的指导下独立完成的研宄成果=除己明确标注或得到许可外,所撰写的学位论文中不包含他人己申请学位或其他用途所使用过的成果,不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果,本人的指导教师对此进行了审定。对本文的研宄做出重要贡献的个
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4、血压是全球范围内最常见的慢性病之一,也是心脑血管病最主要的危险因素,严重危害人类的健康。血管紧张素转化酶(Angiotensin-convertingenzyme,ACE)是一种含锌二肽羧肽酶,在血压调节系统中起重要作用。ACE抑制肽是是一类从食物中提取的具有降高血压活性的多肽,通过作用于ACE而抑制血压的升高。本文主要研究了二肽YS和十肽INNQFLPYPY(命名为INN)的体外ACE抑制活性、体外稳定性、体内降血压活性、抑制类型,并借助分子动力学模拟了这两种ACE抑制肽的作用机制。研究结果如下:(1)采用紫外分光光度法测定ACE抑制肽YS和INNQF
5、LPYPY的体外抑制活性,通过拟合方程发现YS和INNQFLPYPY的ACE抑制率与其浓度存在浓度-活性关系并计算二者的IC50值(半数抑制浓度)。结果显示:ACE抑制肽YS的IC50值为22.62μg/mL,ACE抑制肽INNQFLPYPY的IC50值为210.996μg/mL。(2)ACE抑制肽YS和INNQFLPYPY在4℃、20℃、37℃、42℃、65℃的条件下处理1h后能够保持良好的稳定性。在pH1.0、pH3.0、pH5.0、pH7.0、pH9.0条件下处理2h、3h后检测结果表明:YS在酸性环境下活性稳定性最强,在弱碱环境下的稳定性稍差;A
6、CE抑制肽INNQFLPYPY在中性和弱碱性的环境中具有较好的稳定性,酸性环境对其ACE抑制率影响较大。体外消化稳定性实验显示:ACE抑制肽YS和INNQFLPYPY均具有较好的耐胃蛋白酶和胰蛋白酶消化稳定性。(3)采用抑制酶解动力学方法,探讨了ACE抑制肽YS和INNQFLPYPY的酶抑制类型。分别根据YS和INNQFLPYPY与ACE作用的Lineweaver-Burk方程,确定了YS和INNQFLPYPY均为竞争性抑制类型。(4)通过灌胃原发性高血压大鼠(SHR)和正常大鼠(Wistar)研究ACE抑制肽YS和INNQFLPYPY的体内降血压效果,
7、结果显示:YS和INNQFLPYPY在一定的剂量范围内均能显著降低高血压大鼠的血压,并且对正常大鼠的血压无影响。单次灌胃YS结果显示,各剂量组均在4h左右血压下降最多,15mg/(kg.BW)剂量组的SHR的血压最多下降41.81±4.46mmHg;单次灌胃INNQFLPYPY结果显示,各剂量组均在4h左右血压下降最多,15mg/(kg.BW)剂量组的SHR的血压最多下降34.26±4.13mmHg,二者单次灌胃与卡托普利阳性对照相比均有类似的降血压效果。连续两次灌胃YS后,1~7h内SHR血压持续下降,在灌胃后7h左右血压下降值达最大,为−52.86±
8、4.19mmHg,灌胃后8~12hSHR血压持续回升,12h时血压下降值回升至−
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