尿液脑脊液蛋白测定SOP_UCFP临床意义_检验科生化项目SOP

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1、尿液/脑脊液蛋白测定文件编号：版本号：页码：第页共页1检测原理在反应过程中，焦酚红与钼酸钠结合生成在470nm处有最大吸光度的红色化合物。样本中的蛋白与此化合物在酸溶液中反应，生成蓝紫色的化合物，在600nm处吸光度最大。600nm处的吸光度与样本中的蛋白浓度成正比。焦酚红-钼酸盐+蛋白PR-MO-Protein复合物（在600nm处吸收）2标本采集与处理2.1采血方法脑脊液，随即尿或24h未加防腐剂的尿液。2.2标本保存标本在不加添加剂时存储于4°C下，可至少在三天内保持稳定。2.3注意事项脑脊液标本应

2、避免溶血。尿液标本检测前应充分混匀。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~5孔为溶于甲醇的焦酚红0.20mM，钼酸钠0.35mM，稳定剂和表面活性剂，液体；7~8孔为NaOH0.5N，液体。3.1.2试剂准备直接使用。3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存，有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序尿液

3、/脑脊液蛋白测定文件编号：版本号：页码：第页共页4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。4.4标本检测4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在PatientName处选择性输入病人名字，按en

4、ter，在SampleNo处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXTMODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID选择标本类型）。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOADLIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用

5、采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存直接使用，2~8℃保存。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lo

6、t，以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGNCUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保尿液/脑脊液蛋白测定文件编号：版本号：页码：第页共页存90d,开启后2~8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度每

7、24小至少进行一批，每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为6~250mg/dL,对于超过测定线性范围的结果，用净化水对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。8生物参考区间尿液：<11.9mg/dL<149.1mg/天脑脊液：15~45mg/dL9临床意义测定脑脊液总蛋白主要用于检查血/脑屏障对血浆蛋白质的通透性增加或检查鞘内分泌免疫球蛋白增加。脑脊液总蛋白升高常见于脑组织和脑脊髓膜疾患，

8、如化脓性脑脊髓膜炎、结核性脑脊髓膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰质炎、脑出血等。尿液总蛋白升高常见于肾小球渗透性过高、肾小管重吸收不全和蛋白分泌异常等疾病，如肾功能衰竭、肾病综合症、多发性骨髓瘤等。10参考文献[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司尿液/脑脊液蛋白（UCFP）测定试剂说明书。[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：342~344。编写：审核：批准：