caspase-1在2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化中的作用

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1、Caspase-1在2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化中的作用作者单位：荆州市中心医院（长江大学第二临床医学院）检验科434020;DOI：10.7504/nk2016010203中图分类号：R587.1文献标识码：A摘要：目的调查Caspase-1mRNA在2型糖尿病（T2DM）合并颈动脉粥样硬化（CAS）中的表达水平，并探讨它与斑块之间的关系。方法收集健康对照者组35例、T2DM组26例、T2DM+CAS组81例（包括IMT增厚组与斑块组）、CAS组35例,采用实时荧光聚合酶联反应（RT-FQ-PCR）法检测各组外周血

2、单个核细胞（PBMCs）中Caspase-1mRNA的表达水平，比较各组间差异，并分析斑块组caspase-1mRNA的表达量与crouse积分相关性。结果T2DM组与T2DM+CAS组PBMCs中Caspase-1mRNA的表达量显著高于对照组（P<0.05）；IMT增厚组Caspase-1mRNA的表达量明显高于斑块组（P<0.01）;斑块组中患者Caspase-1mRNA的表达量与斑块crouse积分呈明显负相关（「=-0.467）。结论Caspase-1参与了2型糖尿病和动脉粥样硬化疾病的发展，而

3、且在斑块形成早期表达更为活跃。关键词：Caspase-1;2型糖尿病;动脉粥样硬化;IMT;crouse积分；Caspase-1也称为IL-lβ转换酶（ICE），属于半胱氨酸蛋白酶家族中的一员，这种半胱氨酸蛋白酶可特异性识别底物P1位点的天冬氨酸残基，通过切割IL-lβ、IL-18和IL-33的前体，在炎症反应中发挥着重要作用［1］。而2型糖尿病（type2diabetesmellitus,T2DM）和动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）的发生发展都伴随着炎症反应，那么Caspas

4、e-1在这两种疾病中的作用如何？木文将通过调查Caspase-1mRNA在.相关人群外周血单核细胞的表达量来对其进行探讨。1.材料和方法1.1研究对象根据颈动脉超声、血糖等相关结果，将收集于我院的177名受试者分为健康对照者组35例、单纯2型糖尿病组26例（T2DM）、2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化组81例（T2DM+CAS）、单纯颈动脉粥样硬化组35例（CAS）,T2DM+CAS中包括IMT增厚组37例与斑块组44例。患者除符合诊断标准外，无cryopyrin相关周期热综合征、痛风、阿尔茨海默症。所奋相关检查均经受试

5、者同意。1.2主要仪器与试剂DXC800全自动生化分析仪（美国Beckman公司）;ABI7300荧光定量PCR仪（美国ABI公司）；IE33多普勒彩色超声诊断仪（荷兰Philips公司）;trizon试剂（美国Lifetechnologies公司），批号：14105;HIFI-MMLVcDNA第一链合成试剂盒及GoldStarTaqManMixture试剂盒（北京康为世纪生物科技宵限公司），批号:00021405和00051310;血糖试剂（美国Beckman公司），批号:411207。1.3引物的设计与合成根据G

6、eneBang中人类Caspase-1和β-actin基因序列，使用primerexpressv2.0设计引物及探针，由美国lifetechnologies公司合成，Caspase-1上游：AATTTTCCGCAAGGTTCGATT,下游：ACTCTTTCAGTGGTGGGCATCT,探针：5*-（FAM）TCATTTGAGCAGCCAGATGGTAGAGCG（DAB）-3*,β-actin上游：5'-GCTGTCTGCCTTGGTAGTGGAT-3下游：5,-GCATCGTCACCACCAAA

7、GC-3,,探针：5'-（FAM）ATGGGTCAGGGATGTGCAAGGCA（DAB）-3'o1.4方法1.4.1所冇受试者均测量外周血单核细胞数、血清空腹血糖（FBG）、甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、高密度胆固醇（HDL）、低密度胆固醇（LDL）,同吋收集性别、年龄、高血压史、吸烟史等资料。CAS斑块的超声检测嘱受试者平卧采用彩色超声诊断仪选10MHz线阵探头扫描双侧颈总动脉、颈总动脉分叉及颈内外动脉。①若有斑块，记录各个独立斑块的厚度，并将所测得的所有独立斑块厚度相加作为Crouse积分[2];②若未见

8、斑块，选取颈总动脉距窦部10mm处测量内膜-中膜层厚度（IntimaMediaThickness,IMT）,1.0mm≤IMT≤1.5mm者归入IMT增厚组，IMT>1.5mm者归入斑块组。Caspase-1的检测（1）总RNA提取与逆转录每2ml全血加2ml生理盐水混匀后加2ml淋巴细胞分离液，取外周血单个核细胞，按Triz