葡萄糖测定SOP_GLU临床意义_检验科生化项目SOP

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时间:2018-10-09

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1、葡萄糖测定文件编号:版本号:页码:第页共页1检测原理在5′-三磷酸腺苷(ATP)和镁存在的条件下,己糖激酶(HK)催化葡萄糖的磷酸化,从而形成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)和二磷酸腺苷(ADP)。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)存在的条件下,G-6-P随后被葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)氧化,继而生成6-磷酸葡萄糖盐和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。每存在一个摩尔的葡萄糖,一个摩尔的NAD即被还原成一个摩尔的NADH。由NADH引起的吸收率(同时也是葡萄糖浓度)是用双波长的(340和

2、383nm)终点技术测定。葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸盐+ADPMG++葡萄糖-6-磷酸盐+NAD+G-6-PDH6-磷酸葡萄糖盐+NADH+H+2标本采集与处理2.1采血方法空腹采不抗凝静脉血或氟化钠抗凝静脉血2~3ml。2.2标本保存肌酐在血清或血浆中冷藏可稳定7天,可无限期冷冻保存。肌酐在尿液中在室温可稳定2-3天,冷藏稳定5天。2.3注意事项糖酵解将使室温中放置的正常未离心的凝固血液中的血清葡萄糖每小时下降大约5%到7%。在分离的但未溶血的无菌血清中,葡萄糖浓度在25°C条件下将保持稳

3、定8小时,在4°C条件下将保持稳定72小时;在更长的储存条件下将发生稳定性的变化。3在样本中加入碘醋酸钠或者氟化钠(NaF)后,糖酵解可以被抑制,并且葡萄糖在室温下最长可以保持稳定3天。标本应避免溶血、脂血、黄疸。3试剂和设备3.1试剂采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。3.1.1试剂组成试剂船1~6孔为HK15U/mL,葡萄糖-6-磷酸盐30U/mL,NAD8mmol/L,ATP15mmol/L,MG++7.4mmol/L,稳定剂,缓冲液,液体。3.1.2试剂准备直接使用。葡萄糖测

4、定文件编号:版本号:页码:第页共页3.1.3试剂保存试剂2~8℃保存,有效期内稳定。3.2质控品美国BIORAD液体多项质控品。3.3校准品西门子校准品。3.4仪器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自动生化分析系统。4操作程序4.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。4.2样品签收严格按照标本接收程序签收标本。4.3标本处理以2500~3000r/min,离心6~10min,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8℃保存。4.

5、4标本检测4.4.1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按F1:ENTERDATA,在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在PatientName处选择性输入病人名字,按enter,在SampleNo处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的按键改变Mode(按F7:MEXTMODE选择样品管类型)、Priority(按F4:NEXTPRIORITY选择样品的处理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLU

6、ID选择标本类型)。4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOADLIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行样品检测。4.4.4检验后标本保存标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。5校准程序5.1校准品准备和储存每瓶加2.0ml蒸馏水复融,轻轻旋转摇匀,室温放置30min,即可使用。5.2校准条件在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。葡萄

7、糖测定文件编号:版本号:页码:第页共页5.3校准程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP&RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号CalibratorProduct和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置StartatPosition,最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4:ASSIGNCUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品

8、架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”运行键运行校准程序。6质量控制程序6.1质控品准备和储存质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期,未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。6.2质控水平和分析批长度每24小至少进行一批,每批2个浓度水平。6.3质控操作程序与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。7性能参数本法线性范围为0~27.8mmol/L

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