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1、临床微生物标本的质量控制山东省立医院检验科金炎sdjinyan@163.com“君子慎始,差之毫厘,谬以千里”——《礼记》随着现代医学的进步和人类对疾病的不断认识,医学的学科分类越来越细,疾病的分类越来越完善,而与之相关的实验室检验也日趋精密复杂。在多数情况下,实验室检验比病人的主诉敏感、准确、客观,而现代医学对疾病的诊断和治疗越来越依赖于实验室检验结果。为了取得准确的、可靠的检验结果,必须取得高质量的标本。高质量的标本是高质量的检验的第一步。没有高质量的标本,再先进、再精密的仪器也得不出准确的结果,而很多采集标本的患者和医务人员都有忽视了标本的采集质量而引起结
2、果很大的偏差的经历。微生物实验室设立目的协助临床医师诊断及治疗感染症检验结果提供监测抗生素治疗疗程提供流行病学数据供医院感染管理制定措施参考微生物实验室功能检查及培养临床标本中的微生物正确鉴定临床上有意义的分离菌株对有意义的分离菌株进行药物敏感性试验提供快速且正确的检验报告成功治疗感染症因素成功分离病原菌-标本收集、运送、保存-标本处理方法“正确的微生物学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。”著名的临床微生物检验专著ManualofClinicalMicrobiology的主编PatrickMurray临床标本的分类带菌体液无菌体液
3、痰血液咽拭子脑脊液尿液关节腔积液粪便胸腹水其他类别其他类别标本收集原则1、可能致病菌-收集到越多越好-保持其活性2、可能污染菌-非无菌部位①避免污染:消毒②减少增生:低温保存及使用输送培养基-无菌部位避免污染:切实消毒为什么要做血培养1、查病因-发烧原因-细菌性,真菌性,结核性或病毒性感染2、正确用药-避免耐药菌株的产生-降低病患并发症及死亡率3、节省医疗费用-降低病患抗生素使用时间及住院天数血培养提升分离率及判别是否污染①采集时机:尽可能在用抗菌药物前;尽可能在发冷后、发烧前采集血液②至少收集2套血培养瓶(需氧及厌氧),但一个穿刺点只采集一套③准备无菌的皮肤、
4、培养瓶口及采血部位-静脉或动脉穿刺,不要与血气和血沉标本一起采血;-不推荐血入瓶前换针头,不推荐静脉血直接入瓶;-不可由血管导管注射帽(Ⅳlock)抽取④采集足量的血液-成人5至10毫升/瓶,先打入厌氧瓶-如果血量不足,则以需氧瓶为优先血培养采检建议急性高烧-10分钟内,由不同的部位抽取2套标本非急性高烧疾病-24小时内,由不同的部位抽取2-3套标本(间隔不小于3小时)急性心内膜炎-1-2小时内,由三个不同的部位抽取3套标本亚急性心内膜炎-24小时内,由三个不同的部位抽取3套标本,每套间隔≥1小时,当培养24小时后,若为阴性培养,应再送2-3套热不明-由不同的部
5、位抽取2-3套标本,每套间隔≥1小时,当培养24-48小时后,若为阴性培养,应再送2-3套针对小儿病人,应立即采血导管相关性败血症:如怀疑导管相关性败血症,应同时从静脉和导管采血各一套送检。2003ManualofClinicalMicrobiology,8thEdition菌血症病人血中细菌浓度成年病人:链球菌心内膜炎1to30organisms/ml葡萄球菌心内膜炎1to20organisms/ml革兰氏阴性菌血症少于1to10organisms/ml革兰氏阳性菌血症1to300organisms/ml幼儿病人:革兰氏阴性菌血症5to1000organism
6、s/ml75%幼儿菌血症病人血液有>100organisms/mlInfectDisClinicsNAmer2001;15:1009所以采血量一定要足够。成人一般为10ml,新生儿与婴幼儿为1~2ml。有人引述多篇文章指出:对成人每增加1ml血量平均能提高阳性率3.2%。婴幼儿血培养婴幼儿由于免疫系统发展未成熟,所以血流感染时症状轻微且无特异性,包括:呼吸急促、嗜睡、活动力不佳、吸食能力变差、黄疸、腹泻、发绀等,与成人感染的临床表现不同。不同于成人血培养,由于厌氧菌感染极少发生在婴幼儿病人,因此建议只采用需氧瓶;厌氧培养只考虑针对特殊的高危险群体。皮肤消毒参照成
7、人的方法,新生儿除外。用头皮针为新生儿和婴幼儿取血时,应换针头再将血注入培养瓶中。儿童的采血量为不超过总血容量的1%。无菌皮肤的准备血培养瓶口应以70%的酒精消毒剂处理以采血点为中心,由内往外的方向用70%的酒精用力涂抹皮肤碘伏由内往外的方向用力涂抹皮肤,等待约2-3分钟;如使用碘酊等待约30秒,让碘液干燥以发挥杀菌效果70%的酒精由内往外的方向涂抹去除碘酒液。菌血症种类反应不同的细菌进入血流的机制①暂时性菌血症-正常菌丛②间歇性菌血症-不定时释放③持续性菌血症-直接接触尿液标本的留取正常人尿液是无菌的,而尿液细菌培养最大的问题是杂菌污染。正常人外尿道有大肠杆菌
8、、葡萄球菌等存在。而这些