临床微生物标本采集及相关质量控制课件

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1、微生物标本采集细菌学检验误差分布55%41%4%微生物样本采样基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.选择准确的解剖部位、合适的时间采集标本；5.采集足够量的标本，以保证检测的阳性率；6.采样后立即送检或床旁接种7.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养8.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂9.送检标本应注明来源和检验目的一、血液、静脉导管标本1.采集指征发热（38C），寒战白细胞增多，特别有“核左移”，粒细胞减少，血小板减少皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低,及呼吸加快CRP升高2.采集时间患者出现寒战、体温

2、升高前；使用抗菌药物前；患者已使用抗菌药物的情况下，若出现明显的发热前期症状，可在寒战前或寒战后1h内采血；若无明显的寒战阶段，应在第二次服抗菌药物前采血；对于无明显感染病灶或未找到发热原因的发热患者，先在不同部位采集2-3份血标本，间隔大于或等于1h，24h-36h后再次采集2份以上；疑似沙门菌感染的患者在病程第1-2周采集静脉血；3.采集部位及次数从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采血培养。至少做到“双侧双瓶”。必要时从下肢静脉采血做第三套血培养。一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个血培养。为什么要求多次采血？（1）菌血症患者多数为间歇性，病原菌周期性出现在血液中，在无菌时

3、期不管临床症状经历的严重程度，患者血液中的病原菌浓度水平相当低，因此要求多次采血，但24h内一般不超过3次。（2）血液感染有原发性和继发性之分，多次采血培养有助于循环外感染部位的诊断；（3）多次培养出“共生菌”，则可以确定为感染的病原菌；出现多种细菌在排除污染可能后，可考虑“复数菌”败血症的诊断。4.采血量要求：成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于2ml。说明：血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。成人血培养采血量在2~30ml之间，病原菌检出率与采血量成正比例增长。每增加1ml的血液，病原菌的检出率增加3.2%。儿童

4、患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。（二）.导管相关性血流感染的标本采集导管相关性血流感染：最常见的为血管内导管相关性血流感染（CRBSI），发生率与导管种类、导管相关医疗操作的频率、患者病情等因素有关。短期留置的血管内导管，皮肤定值菌通过皮下隧道移植到导管尖端，随后引发感染；长期留置的血管内导管，导管头被细菌污染，导管腔发生细菌定植，引发感染；血行传播的细菌可定值在血管内导管中，引发新的病灶。标本采集：1.导管采集：用75%酒精消毒导管周围皮肤；移动导管，无菌剪刀剪取尖端末端5cm，直接置入无菌试管中；立即送检，防止干燥。不推荐使用增菌肉汤培养，因为增菌扩大了

5、污染的几率，导致结果不可靠。2.采集至少2份血培养，至少1份经外周静脉血穿刺采血，至少1份从导管中心或静脉留置口隔膜取血，两者之间采血时间应≤5min。二、呼吸道标本（一）采集指征凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音。外周白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高。X线检查提示肺部有炎性浸润或胸腔积液。出现感染性休克和呼吸衰竭等患者。（二）采集方法与次数以晨痰为佳。用清水反复漱口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌容器中，尽快送检。对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天；不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状改变；怀疑分枝杆菌感染

6、者，应连续收集3天清晨痰液送检。对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集检验标本时必须注意生物安全防护。三、尿培养标本（一）采集指征1.有典型的尿路感染症状；2.有肉眼脓尿或血尿；3.尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性；4.有不明原因的发热，无其他局部症状；5.留置导尿管的患者出现发热；6.膀胱排空功能受损；7.泌尿系统疾病手术前；8.有尿路感染症状者，前次培养结果阴性或抗菌治疗48h后仍持续发热。9.抗生素停药后，感染症状再次出现。（二）采集时间与次数1.应选择在抗菌药物应用前或停用抗菌药物5天后采集尿液。2.通常采集清晨第1次尿液送检。3.怀疑沙门菌感染时应

7、在发病2周左右采集尿液培养。4.对无症状的患者应连续采集3天晨尿送检。5.怀疑结核分枝杆菌感染时，患者应停药1-2天后采集晨尿或24h尿的沉渣部分10-15ml送检。（三）采集方法清洁中段尿留取清晨清洁中段尿标本，先用肥皂水仔细清洗会阴部，再用清水冲洗尿道口周围；将前段尿排去，留取中段尿10ml左右于无菌容器内，立即加盖送检，2h内接种。该方法简单、易行，是最常用的尿标本收集方法，但是容易受到会阴部细菌污染。下列因素可使尿液中细菌数量减少，判断结果时应注意①使用抗生素治疗，细菌生