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时间:2018-10-07
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1、微生物检验标本采集罗南英2016年2月25日基本原则1.抗生素使用前;2.无菌采集,避免污染(环境、正常菌群等)3.及时送检,通常室温不超过2h。4..运送过程避免污染、渗漏、脱盖、密封不好等5.如疑似对低温敏感的淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌感染标本应立即处理。脑脊髓液、生殖道、眼睛、内耳标本绝不可以冷藏。血液及骨髓标本一、标本送检指征病人出现以下临床表现之一时,应采集血培养。①发热(≥38℃)或低温(≤36℃);②寒战;③白细胞增多(>10×109/L,特别有“核左移”时);④粒细胞减少(成熟的多形核白细胞<1×109/L);⑤血小板减少;⑥皮肤、粘膜出血;⑦昏迷;⑧多器官衰竭;⑨
2、血压降低;⑩呼吸加快。几种特殊情况:①可疑新生儿败血症时,除发热或低温外,很少培养出细菌,应增加尿液和脑脊液培养。②老年菌血症病人可能不发热或不低温,如伴有身体不适、肌痛或中风,可能是感染性心内膜炎,也应采取血培养。★骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的,临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者,抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。【标本的采集方法】防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题,采血前严格执行消毒程序是十分重要的。1皮肤消毒程序:用蘸有复合碘棉签从穿刺点向外以1.5~2cm直径画圈进行消毒,消毒皮肤作用60s。★对碘过敏的病人只能
3、用75%酒精消毒,消毒60s,待穿刺消毒部位干燥后穿刺采血。2培养瓶消毒程序①用75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞子,作用60s。②在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。3培养瓶接种程序抽取血液后,不要换针头,直接注入血培养瓶中,轻轻颠倒混匀,以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养,应先将标本接种到厌氧瓶中,然后再注入需氧瓶,严格防止将空气注入厌氧瓶中。(蝶形针/注射器)血培养采集的时间和频率①采血培养应尽量在抗菌药物使用之前,在24h内采集2~3套血培养,每套包括1个需氧瓶+厌氧瓶。因为研究已证实,2~3套血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。②入院前2
4、周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3天,每天采集2套,可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。③对间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h采集血液,或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。④怀疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者,应在不同部位采集2~3套血培养。⑤不明原因发热,如隐性脓肿、伤寒热和波浪热,先采集2~3套血标本,24~36h后估计体温升高之前,再采集2套以上。⑥怀疑为菌血症或真菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,选择其它种类的培养瓶,如高渗培养瓶,中和抗生素培养瓶,结核菌培养瓶等,以获得罕见的或苛氧的微生物。⑦
5、怀疑为细菌性心内膜炎,在1~2h内多部位采集3份血标本,如果24h阴性,再采取3套以上的血标本。⑧怀疑为细菌性脑膜炎应在发热的头1~2天内,怀疑为伤寒应在发热第一周内;怀疑为布鲁菌病应在预期发热前取血;经培养24~48小时如未见细菌生长,应再连续取血两次。⑨静脉采血通常用肘正中静脉,怀疑亚急性细菌性心内膜炎也可自股动脉采血。对血培养阴性而高度怀疑伤寒或布鲁菌病者,可抽取骨髓培养和辅助血清学试验有助于诊断。2采血量成人:推荐每个血培养瓶应加的血量为8~10ml。儿童:因很难获得大量的血液,一般静脉采血1~3ml用于血培养。骨髓采血量一般为1~2ml。★血液量太多或太少都不利于细菌的检出,血液的培
6、养量每增加1ml,阳性率增加3~5%。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素,注入血液太多可能会抑制细菌的生长。3标本的保存及运送含血样的培养瓶应立即送往实验室;如不能及时送检,应将其放在室温,切忌冰箱存放。因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡,而使培养阳性率下降在运往实验室的途中如果天气寒冷,应采取一定的保温措施。标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。(痰)上呼吸道标本一、标本送检指征①咳嗽、咳痰:痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰;②咯血:肺结核病人常痰中带血;③呼吸困难;④发热;⑤胸痛:当炎症病变累及壁层胸膜时,会发生胸痛。★肺部感染的患者有25~50%可能发生
7、菌血症,应同时作血培养。二、标本采集【标本采集容器】一次性无菌痰培养杯。【标本采集方法】1自然咳痰法:咳痰前,先用清水或漱口液反复漱口(为减少口腔正常菌群污染标本),有假牙者应取下假牙,然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10%NaCL水溶液,使痰液易于排出。对咳痰少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,使其咳嗽。2支气管镜采集法:用支气管镜在肺内病灶附
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