临床微生物标本的采集

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1、临床微生物标本的采集无锡市第二人民医院检验科胡锡池正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！标本采集、运送是分析前质量控制的重要部分。分析前程序包括：从临床医生开出医嘱开始,到分析检验程序时终止的步骤,包括检验申请、患者的准备、原始样品的采集、运送到实验室并在实验室进行传输。临床反馈不满意的检验结果中,有80%的报告最终可溯源到标本质量不符合要求。微生物样本采样基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查；2.在抗菌药物使用前采集标本；3.采样时严格执行无菌操作；4.采样后立即送检；5.标本容器须灭菌处理，但不得使

2、用消毒剂；6.送检标本应注明来源和检验目的；7.混有正常菌群污染标本，不可置液体培养基。不可增菌各类标本储存的环境4℃冰箱：痰、尿液、粪便、活检组织、气管冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等。室温（25℃）：脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、喉、血液培养、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。常见不合格标本主要原因标本采集时间错误；容器错误；标本量不足；标本未及时正确运送；以及暂存条件错误；。。。。。。临床微生物检验重要样本类型血液培养脑脊液培养呼吸道标本培养尿液培养生殖道样本培养粪便培养其他无菌体液或分泌液血培养的采集规范

3、血培养采集的指征当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养。怀疑患者有血流感染的症状有：不明原因的发烧(＞38℃)或体温过低(＜36℃)白细胞增多（＞10,000/ul），粒细胞减少（＜1,000ul）休克，寒颤，僵直血培养采集的指征血流感染的症状有：严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，…)心率异常加快低血压或高血压呼吸频率加快新生儿可疑菌血症,可以增加做尿液和脑脊液培养。关于采血时机尽可能在患者寒战或开始发热时采血；在患者接受抗生素治疗前采血；如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血

4、培养。血培养采集的消毒皮肤消毒培养瓶消毒皮肤消毒程序，严格执行三步法:1、用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上；2、用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s，从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上，涂擦穿刺皮肤2遍，待干燥。3、75%酒精脱碘：用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒液，待酒精挥发干燥后采血。培养瓶的消毒1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖。2.75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。3.自然待干。4.将标本注入培养瓶内。5.颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集。关于采血套数与采血部位成人“一套”血培养应该

5、包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫“一份”。注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一个穿刺点获得。最好从另一侧抽血。儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。Weinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548>每位患者每次采血最少2套，3套更好>初发患者，绝不能只采1套标本>多个穿刺部位采血。多部位同时发生污染

6、的几率较小，便于对结果进判断采集部位推荐从外周静脉采集血液标本。不推荐动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大。不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读提供解释。关于采集血液量采血量是影响灵敏度最关键因素成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每瓶8－10ml，共20ml；要求至少采两份标本，即40ml。儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采集血量＜1％总血量下，一般为1－3ml采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90％以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感

7、染05040302010采血量(ml)与检出率的关系100908070605101520304045505560ml%RelativeYield25Overall35血培养物每增加一毫升，真性菌血症成年人微生物的检出率增加3％但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例为1：4－1：10关于各种血液标本的采集顺序血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。所以要最先采集血培养标本。培养瓶的储存温度不需冷藏，更不能冷冻

8、。保存在15－25℃的室温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。呼吸道标本上呼吸道样本下呼吸道样本关于呼吸道标本临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道，上呼吸道定植有大量的正常菌群，而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道，通常无菌。下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎