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《反相高效液相色谱法测定藏药材红毛五加中金丝桃苷的含量 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、反相高效液相色谱法测定藏药材红毛五加中金丝桃苷的含量李莹 袁玮 刘超 刘圆【摘要】目的建立藏药材红毛五加药材中金丝桃苷的含量测定方法并比较其不同药用部位及不同产地、不同采收期的红毛五加皮中金丝桃苷的含量。方法KromasilC18柱（4.6mm×250mm,5μm）,柱温30℃，流动相甲醇（A）-0.5%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱，程序为：基线（A∶B=30∶70）,0～5min(A∶B=35∶65),5～15min(A∶B=40∶60),15～30min（A∶B=50∶50）；检测波长358nm,流速1ml
2、·min-1。结果金丝桃苷在2.90×10-3～0.58μg范围内峰面积与进样量具有良好的线性关系,回归方程Y=4×106X-14065，r=0.9999(n=9)，平均回收率为100.6%，RSD为0.96%（n=6）。结论该法简便、准确、重复性好,有助于红毛五加质量控制方法的研究。【关键词】红毛五加；金丝桃苷；反相高效液相色谱 Abstract：ObjectiveTodevelopanRP-HPLCmethodfordeterminationofHyperosideinAcanthopanaxgiral
3、diiHarms,andtodeterminethecontentsofHyperosideindifferentparts,differentareasanddifferentcollectiontimeofAcanthopanaxgiraldiiHarms.MethodsTheanalysisasilC18columnelutedobilephaseconsistedofmethanol(A)-0.5％phosphoricacid(B).Thegradientelution0to5min.iiTherat
4、ioofAandB5to15min.ⅲTheratioofAandB15to30min.Thedetectivel/min.ResultsThecalibrationcurveethodissimple,accurateandreproducible.ItisusefulforqualitycontrolofAcanthopanaxgiraldiiHarms. Keys;Hyperoside;RP-HPLC藏药材红毛五加为五加科五加属植物AcanthopanaxgiraldiiHarms的干燥茎皮。《中国药
5、典》尚未收载红毛五加药材。在文献报道中发现刺五加中含有金丝桃苷成分〔1〕，金丝桃苷对钙内流有较强的选择性阻滞作用，并对心肌有保护作用，对脑缺血损伤也有保护作用，调节免疫作用，临床上主要用于治疗心脑血管疾病、抗菌、抗炎、止咳、平喘、祛痰等，且疗效突出，应用前景十分广阔〔2〕，这与红毛五加皮的对心血管系统、免疫系统、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等药理作用〔3〕相一致。红毛五加与刺五加为同科同属植物，目前作者尚未查阅到红毛五加中有关金丝桃苷的研究。四川为红毛五加药材的主要产区，其传统的入药部位为茎皮，本课题组的前期研究表明
6、其茎皮中其它有效成分的含量较高〔4～8〕。本实验拟采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法考察比较红毛五加不同药用部位、不同产地和不同采收期的红毛五加皮中金丝桃苷的含量，以期为红毛五加药材的质量控制、最佳采收期的确定、资源的合理利用提供参考。 1仪器与材料pos的干燥茎皮。 2方法与结果 2.1色谱条件 KrosmasilC18柱（250mm×4.6mm,5μm），柱温30℃。流动相为甲醇（A）-0.5%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱，程序为：基线（A∶B=30∶70）,0～5min(A∶B=35∶65)
7、,5～15min(A∶B=40∶60),15～30min（A∶B=50∶50）；检测波长358nm,流速1ml·min-1。金丝桃苷峰可以达到基线分离，峰形对称，分离度好，按照金丝桃苷峰计，理论塔板数不应低于5000，对照品溶液及红毛五加样品溶液的高效液相色谱图见图1。 2.2溶液的制备 2.2.1对照品溶液的制备 精密称取金丝桃苷对照品适量，加甲醇配置成29.00μg·ml-1的溶液。 2.2.2样品溶液的制备 称取红毛五加药材粉末（过40目筛）约2g，精密称定，置圆底烧瓶中加入石油醚溶液25ml
8、，称定重量，加热回流1h，取出，过滤，弃去滤液，挥去溶剂，滤渣中加入25ml甲醇，称定重量，回流2h，取出，冷却至室温，用甲醇补足减失重量，摇匀，过滤，取续滤液，过0.45μm的微孔滤膜，作为样品溶液。 2.3线性关系的考察 分别精密量取上述对照品溶液0.1，0.5，1，2，4，6，10，20μl，在上述色谱条件下测定峰面积。以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为Y=4
