反相高效液相色谱法测定照山白中金丝桃苷的含量

《反相高效液相色谱法测定照山白中金丝桃苷的含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、反相高效液相色谱法测定照山白中金丝桃苷的含量【摘要】目的建立照山白中金丝桃苷的高效液相色谱法。方法采用DiamonsilTMC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱，以甲醇-5%磷酸溶液-三乙胺（44∶56∶0.37）为流动相，检测波长为360nm，流速为1.0ml/min。结果金丝桃苷在0.05～0.28μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998，n=6）,平均回收率为99.83%（n=5）,RSD为0.90%。结论该方法快速、简便，结果准确，可用于照山白中金丝桃苷的质量控制。【

2、关键词】反相高效液相色谱金丝桃苷照山白　　RPHPLCDeterminationofHyperininManchurianrhododendronLeaf　　SUNHeying，FUPingping，HAONa　　1.SchoolofMedicine,HebEiUniversity，Baoding,HebEI071000,China；　　2.BaodingInstituteforDrugControl，Baoding，Hebei071051,China；　　3.BaodingSanjiuBi

3、opharmaceuticsCo.，Ltd.，Baoding072656,China　　Abstract:ObjectiveToestablishanRPHPLCmethodforthedeterminationofHyperininManchurianrhododendronLeaf.MethodsTheDiamonsilTMC18(4.6mm×250mm,5μm)obilephaseethanol-5%phosphoric-triethylamine（44∶56∶0.37）.Theflol/

4、min,thedetective.20μlsamplerandexternalmethodethodisquickandsimpleination；Hyperin；ManchurianrhododendronLeaf照山白为双子叶植物药杜鹃花科植物小花杜鹃的枝叶或花，具有祛痰止咳、通络止痛等功效，可用于治疗急慢性气管炎、哮喘、痛经、产后周身疼痛等病症，其主要成分为各种黄酮类成分，如金丝桃苷及多种皂苷及多糖类等［1］。有报道应用高效液相色谱法，以甲醇－3%醋酸溶液等为流动相，测定山楂等不同药材中金丝

5、桃苷的含量［2～4］。本实验采用RPHPLC法，以甲醇5%磷酸溶液三乙胺为流动相，实现了对照山白中金丝桃苷的准确分析。现报道如下。　　1仪器与试药C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-5%磷酸-三乙胺（44∶56∶0.37）；检测波长为360nm；流速1.0ml/min；进样量20μl；室温进样。在上述色谱条件下，金丝桃苷峰形良好，无杂质峰干扰，以金丝桃苷计算的理论塔板数大于5000，保留时间约为15min，与相邻色谱峰的分离度均大于1.5，见HPLC图。　　2.2实

6、验溶液的制备　　2.2.1对照品溶液的制备　　　精密称取金丝桃苷对照品11.60mg，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为0.232mg/ml的溶液；分别精密量取0.10，0.20，0.30，0.40，0.50，0.60ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。　　2.2.2供试品溶液的制备　　取照山白药材适量，粉碎，过20目筛，取约0.2g，置50ml圆底烧瓶中，精密加入90%乙醇20ml，称定总重量，加热回流1h。精密称定，加90%乙醇补足损失量

7、，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加90%乙醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。　　2.3方法学考察　　2.3.1线性关系考察　　　精密量取对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录峰面积。以进样量（μg）为横坐标，相应峰面积为纵坐标，进行线性回归。结果在0.05～0.28μg范围内，金丝桃苷进样量与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为Y＝8.7531X－0.0152，r＝0.9998。　　2.3.2精密度实验　　　取照山白药材适量，粉碎，

8、过20目筛，取约0.2g，精密称定，按2.2.2项下方法制备供试品溶液。精密量取20μl，注入液相色谱仪，重复进样5次，所得峰面积的RSD为0.23%（n=5），表明本方法的精密度较好。　　2.3.3稳定性实验　　　取同一供试品溶液，分别于0，1，2，4，8，12h，进样20μl，记录峰面积，结果峰面积基本不变，RSD为0.39%（n=6），表明供试液至少在12h内稳定。　　2.3.4重复性实验　　精密称取同一批号的样品5份，分别按样品测定项下方法进行测定，取照山白药材细粉，精密称