类风湿关节炎滑膜巨噬细胞来源的研究

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1、类风湿关节炎滑膜巨噬细胞来源的研究类风湿关节炎滑膜巨噬细胞来源的研究2010-09-06戴冽　叶志强　汤美安　尹培达　苏祖兰摘　要：目的　了解类风湿关节炎(RA)滑膜巨噬细胞的来源。方法　采用免疫组化LSAB法对26例RA滑膜，20例非RA滑膜及7例正常滑膜进行连续切片CD68和PCNA染色。结果　正常滑膜衬里层细胞几乎全部CD68阳性而PCNA阴性，衬里下层CD68和PCNA阳性细胞极少；RA滑膜衬里层和衬里下层PCNA阳性细胞数较非RA滑膜明显增多(P＜0.05)，衬里层滑膜细胞大部分CD68阳性，衬里下层CD68阳性细胞数较非RA滑膜明显增多(P＜

2、0.05)，并且衬里层和衬里下层部分CD68阳性的细胞PCNA也阳性。结论　RA滑膜增多的A型巨噬样滑膜细胞和衬里下层的巨噬细胞都有局部增生，表明RA滑膜衬里下层聚集的巨噬细胞除来源于血液中的单核细胞趋化转移外，还与巨噬细胞在炎症局部增生有关。关键词：关节炎，类风湿；　巨噬细胞；　滑膜ResearchonsourceofmacrophageinrheumatoidsynoviumDAILie　YEZhiqiang　TANGMeian　etal（DepartmentofRheumaticImmunology,ThirdAffiliatedHospitalo

3、fSunYat-senUniversityofMedicalSciences,Guangzhou510630,China）Abstract：Objective　Toknowthesourceofmacrophageinrheumatoidsynovium.Methods　CD68andPCNAweredetectedbyimmunohistochemicalLSABmethodonserialsynovialsectionsof26casesofRA,20casesofcontrolnon-RAand7casesofnormalsynovia.Resul

4、ts　TheliningcellsofnormalsynoviawerealmostallCD68-positiveandPCNA-negativewhileCD68-andPCNA-positivecellsinsubliningareawerescarce;PCNA-positivecellsinliningandsubliningareasofRAsynoviaweresignificantlyincreased(P＜0.05),mostliningsynoviocyteswereCD68-positiveandtheCD68-positivece

5、llsinsubliningareawerealsosignificantlyincreased(P＜0.05),someCD68-positivecellsinliningandsubliningareasofRAsynoviawerealsoPCNA-positive.Conclusion　Bothmacrophage-likesynoviocytesandinfiltratedmacrophagesinsubliningareaofRAsynoviahavelocalproliferation.Keywords：Arthritis,rheumato

6、id;　Macrophage;　Synovialmembrane▲　　巨噬细胞在类风湿关节炎(RA)关节破坏中的作用及重要性的认识是近年RA发病机制研究的一大进展。RA滑膜中有大量聚集的巨噬细胞，但巨噬细胞在RA滑膜中的来源及聚集机制尚未完全阐明。为此，我们采用滑膜组织连续切片CD68和增生细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色方法，探讨巨噬细胞局部增生在RA滑膜巨噬细胞聚集中的作用。1　材料与方法1.1　滑膜标本来源及对象：所有滑膜标本均取自关节镜手术及关节置换术患者，其中RA滑膜26例，诊断符合1987年美国风湿病学会(ARA)修订的诊断标准［1］，男8

7、例，女18例，年龄21～72岁，平均年龄(46±13)岁，病程0.5～26年，平均病程(9±7)年；非RA组骨关节炎(OA)滑膜14例，男6例，女8例，年龄39～75岁，平均年龄(51±14)岁，病程8个月～20年，平均病程(13±8)年，外伤性关节炎滑膜6例；正常滑膜7例，取自半月板损伤患者。1.2　方法：滑膜组织离体后立即用10%甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，连续切片，切片厚度为4μm，分别作HE染色和CD68、PCNA免疫组化染色(LSAB法［2］)。CD68单抗(DAKO，MO814)、PCNAPC10单抗(DAKO，MO879)工作液浓度分别为

8、1∶200、1∶100。CD68检测时需进行微波修复抗原。DAB显色，苏木素复染