大鼠在体肠吸收方法研究

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1、大鼠在体肠吸收方法研究摘要：目的介绍大鼠在体及离体肠吸收的实验方法及研究进展。方法对有代表性的文章进行分析，归纳和整理。结果综述了药物在体及离体肠吸收的操作及应用。结论采用大藏在体及离体模型对药物肠道吸收行为作出科学的评价。关键词：大鼠；肠吸收；方法1大鼠在体模型1.1单向灌流模型1.1.1实验方法［1，2］将禁食大鼠，ip0.2g/ml乌拉坦溶液麻醉（5ml/kg），行固定设置，采取红外灯保证试验体温在37°C，随后按照腹部中心线切开腹腔3cm,将试验段肠行两端标准切开之后置入管道结扎。将生理盐水（3

2、7°C）按照一定流速灌肠清洁，随后完全排空生理盐水，连接装置，按照事先准备的使用药液（37°C）进行供罐，统计记录液体灌流时间，并收集不同时间段内外流积液，并精确量取流出液体积和供试液减少的体积数或重量。1.1.2特点通过直接测定灌入量和流出量的体积或重量变化，借以判断某种物质的吸收情况。廖正根等人运用单向灌流模型并采用HPLC法分别测定桂枝茯苓胶囊内容物的灌流液以及直接溶解有这3种成分的灌流液在肠灌流过程中的浓度变化P］。结论：桂枝茯苓胶囊中3种有效成分在大鼠小肠主要以被动扩散方式吸收。1.2循环灌流

3、模型1.2.1实验方法［3,4］将禁食大鼠ip戊巴比妥钠40mg/kg,麻醉后固定。沿腹中线切开腹腔（约2.5cm）:在实验肠管两端各切一小口，在上端小口处插入直径为0.3cm的玻璃管，并用线扎紧。用注射器将37°C的生理盐水缓缓注入肠管，洗去肠管内容物至净。然后在实验肠管下端小口处插入玻璃管，并用线扎紧。将肠管两端的玻璃管与蠕动泵的胶管连接，形成回路，开动蠕动泵。先以一定流速循环lOmin后，将流速调为2.5ml/min，分别于回流后0.25、0.5、1.0、1.5、2.、2.5、3.0h取样5ml，

4、经0.45um微孔滤膜滤过，分别用测定药物的浓度。1.2.2特点循环一定时间后，分析肠管内，外液中物质浓度的变化，测定其运转情况。宋洪涛等人采用大鼠在体肠段灌流实验［4］，主要从药物浓度、pH值、吸收部位等3方面对红花黄色素的肠段吸收特性进行研宄。结果：各肠段的吸收速率常数按空肠、十二指肠、回肠、结肠顺序依次下降。1.3肠襻法1.3.1实验方法［5］将大鼠麻醉，开腹结扎肠腔，需做部位研宄时，可分段结扎肠腔，将含有一定浓度的人工肠液诸如肠襻中，经过一定时间吸收后，取出肠襻，收集冲洗肠腔内肠液，测定药物剩余

5、量。1.3.2特点［5］通过测定药物的剩余量，了解药物的吸收情况，且该发较在体回流法操作简单，但由于肠腔内容物存在，分析样品处理较复杂。2大鼠离体模型2.1外翻肠囊法2.1.1实验方法［6］麻醉动物，取出小肠，一端插管注入生理盐水排除内容物。用一细玻棒将其翻转，使黏膜朝外浆膜朝内。肠一端节扎，另一端接一取样器，注入一定体积台氏液于肠囊内并将肠囊置于含有台氏液（内含药物）的瓶中，37°C孵育，充分供氧，定时取样。2.1.2特点［7］首先将动物麻醉，或实验前处死。这样的小肠外翻后，肠浆膜表面所附着的液体很少

6、，从而能较精确的了解吸收后浆膜侧液体的容积和成分。它不仅是一个很好的观察吸收的方法，而且还能用于研宄生物膜的转运机制。何盛江和栾立标［8］采用离体小肠翻转肠囊实验，考察了卵磷脂等对苦参碱小肠吸收的促进效果结果:在几种促进剂中，以0.2%SDS对苦参碱的吸收促进作用最为明显。李昊［9］等人对不同肠段（回肠和空肠）的肠管外翻模型进行考察。结果，Rgl在不同肠段的吸收良好，且无明显差异。2.2外翻环法2.2.1实验方法［9］先行将完全分离的一段小肠于一端应用手术线细扎，随后应用玻璃杆经肠腔向结扎肠端口推动，并

7、行翻转。将小肠行横切做环形状分割。将肠环置于药液且确保氧化环境充分的缓冲液内进行孵育。注意在孵育过程应置于水浴摇床之中，从而提升缓冲液温度的控制以及加强搅动力度。最后将肠环置于冰冷缓冲液清洁，停止肠环对药物的摄取。取小肠环、干燥处理、过秤计重，消化肠环，分析药物含2.2.2特点［6］肠黏膜在孵育过程中可导致上皮细胞的损伤，更长时间的孵育可能导致上皮细胞的脱落。所以，外翻环的孵育时间最好控制在lOmin以内。在环制备的过程中保持在4°C，尽量减小孵育过程中组织的损伤程度。2.3组织流动室法2.3.1实验方

8、法将离体肠段剪开形成一定面积的小肠块，安装于扩散池中。扩散池中装入缓冲液。通入空气搅动缓冲液来控制未搅动水层厚度，并且提供组织氧气。药物加入供应室，在接收室取样测量药物不同时间的累积量。剥离肠道的肌肉层以去除其对上皮细胞转运功能的影响。通常向黏膜及浆膜缓冲液中加入谷酰胺或葡萄糖等作为能量源，使组织具有最大可能的存活能力。2.3.2特点①可以改变供应室的化合物组成以研究离子、pH值及其它物质等对药物转运的影响。Uchiyama等用流动室模型研