贲门腺癌P170蛋白表达的研究

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1、贲门腺癌P170蛋白表达的研究作者：彭学宏，陈暖，许建衡，林静华，焦晓阳【关键词】贲门肿瘤［摘要］目的:研究并探讨P170蛋白在贲门腺癌组织中的表达及其意义。方法：用流式细胞术检测55例贲门腺癌患者癌组织和距离肿瘤cm以上癌旁正常组织P170。结果：55例贲门腺癌组织P170阳性表达率为%,癌旁正常组织未见P170表达，两者差别有统计意义。结论：贲门腺癌组织中具有多药耐药性,检测癌组织P170表达水平对化疗效果有一定意义。［关键词］贲门肿瘤；药物耐受性；基因表达；流动血细胞计数　　　StudyonP170ProtEinExp

2、ressioninCardiacAdenocarcInomaAbstract:ObjectiveTostudytheexpressionandsignicanceofP170protEInincardiacTheexpressionofP170proteinincasesofcardiacadenocarcinomawasdetectedbyflowThepositiveexpressionrateofP170protein%incasesofcardiaccancernearcancerhasnopositiveexpre

3、ssionofP170wasanobviousdifferencebetweennormalandcancerTherewasmultipledrugtolerlanceincardiacadenocarcinoma,detectionofP170proteinexpressionincancertissuehadsignificanceinevaluationofchemotherapy.Keywords：Cardiacneoplasms；Drugtolerlance；Geneexpression；Flowcytometr

4、y耐药现象是肿瘤化疗所面临的最常见和最棘手的问题，其结果是肿瘤病人对化疗无效，降低病人的生存期。多药耐药性是指抗某种细胞毒药的耐药细胞对许多结构上无关和作用机制上不同的其他细胞毒药物产生交叉耐药。产生MDR的分子基础是人的mdr1基因高表达引起P170蛋白表达增强，本文应用流式细胞术检测P170蛋白，研究并探讨mdr1基因编码的蛋白P170在贲门腺癌组织中的表达及其意义。1材料与方法临床资料我院近2年住院手术的贲门腺癌患者55例，男47例，女8例。年龄47岁~76岁。入选标准：术前经胃镜病理活检确诊为贲门腺癌，术前未接受化疗

5、，肿瘤病灶起源于贲门，性别、年龄不限。术中取贲门癌组织及距离肿瘤cm以上癌旁正常组织各一块，采用流式细胞术，检测P170蛋白。试剂鼠抗人MDR产物，单克隆抗体，FITC标记兔抗鼠Ig。流式细胞仪检测方法实体瘤组织单细胞悬液制备术中取新鲜贲门癌及距离肿瘤cm以上正常癌旁组织~g，以生理盐水洗去血迹，至于重叠的100目铜网和260目尼龙网上，以眼科剪剪成1mm3碎块，在以眼科镊夹持组织在铜网上轻搓，边挫边以磷酸盐缓冲液将搓下的细胞洗入网下的平皿内，直至组织搓完。将收集的细胞悬液以260尼龙网过滤一次去除组织碎块，收入10ml试管

6、内离心，弃去上清再以PBS漂洗，同前述方法离心2次，均弃上清，备用。免疫标记标记前用PBS漂洗离心1次以去除固定剂，再将每分悬液分两管，其一加20μlP170工作液，其二加20μl羊抗鼠IgG工作液，室温下20min，离心，除上清后加1mlPBS漂洗离心2次，再向上两管中各加20μl羊抗鼠IgG－FITC、室温避光30min，离心后去除上清以除去未结合的荧光抗体，以PBS漂洗离心2次，均弃上清，最后加500μlPBS待检。取少许细胞液图片，在荧光镜下可见P170阳性细胞光点位于细胞膜上。流式细胞仪检测上机前以标准荧光微球调整

7、仪器使变异系数在％以内，上机后收集2万个细胞，荧光强度以对数放大，光散射数据存软盘，测试后在计算机上用CellQuestPlot软件分析数据，由打印机打印结果，包括点图和组方图。MDR1表达产物P170膜糖蛋白含量以P170阳性细胞百分率表示，其计算方法：P170阳性细胞％＝P170阳性细胞数/×100％－非特异结合细胞数/所收集细胞数×100％。阳性表达程度：低表达P170值30%。统计χ2检验。　2结果P170蛋白在贲门腺癌组织中的具体表达情况如表1。表1P170在贲门腺癌组织的表达距离肿瘤cm以上癌旁正常组织，55例标

8、本均未见P170表达。3讨论耐药现象是化疗所面临的最常见和最棘手的问题，其结果是化疗对肿瘤病人无效或疗效降低。MDR即肿瘤细胞对许多常见化疗药物产生抗药性和交叉抗药的能力。产生MDR的分子基础是人的mdr1基因引起P170蛋白表达增强［1］。P170是一种分子量为170KD的糖蛋白，已证实