高效液相色谱二极管阵列检测质谱法鉴定茯苓中的三萜成分

《高效液相色谱二极管阵列检测质谱法鉴定茯苓中的三萜成分》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第79卷分析化学（V*AW-’X>WX*）"研究报告第8期""""""""""""""""""""""""9$$2年8月/D45SNSYBLM5IGBH>5IGPQ4CIG/DS34NQMP%661%8$高效液相色谱!二极管阵列检测!质谱法鉴定茯苓中的三萜成分#于能江"郭继芬"赵毅民"张永祥（北京军事医学科学院毒物药物研究所，北京#$$%&$）摘"要"选用’()*+,-./#%柱，以乙腈!水（（&$0&$）（$12%345）’（6&07&）（2%16%345）’（8&09&）（6%1:&345））（$;#<乙酸）为流动相进行高效液相分离，二极管阵列（=>=）和电

2、喷雾质谱（*,-!?,）两种检测方法在线检测。经过分析紫外图谱和质谱，并与文献进行比较，鉴定了#&个茯苓三萜化学成分，并推测了其余的%个三萜化学成分。应用’)./@=>=@*,-!?,方法可快速有效地鉴定茯苓中的三萜化学成分。关键词"茯苓，三萜，高效液相色谱，二极管阵列检测，质谱!"引""言’)./指纹图谱可以较全面的说明药用植物（或中药）中的化学成分，因而比现有的普遍以一两个主要成分的定性和定量作为质量标准的方法更能保证中药的质量稳定和安全。而二极管阵列检测（=>=）和质谱（?,）检测技术与’)./联用，可以在化学成分分离的同时，在线提供每个谱峰的紫外图谱和质

3、谱信息。在多数情况下，通过对比文献数据或与标准化合物对照可以鉴定各谱峰的化学成分结［#］构。因而，’)./@=>=@?,联用技术可以为得到谱峰化学成分结构基本明确的’)./指纹图谱提供有效帮助。茯苓（!"#$%&"&"’（,CDE;）FBGH;）具有渗湿利尿、和胃健脾及安神功效。主要化学成分为多糖、三［9］萜、脂肪酸、甾醇及酶等。三萜类成分具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节、止吐和增强胰岛素作用等疗［7］效。中外学者对其进行了大量研究，分离得到了大量化合物。其结构类型分为两类：羊毛甾烷三萜烯型（见图9）和7，2!开环!羊毛甾烷三萜烯型（仅存在于茯苓皮中）。羊毛甾烷三萜烯

4、型从环内双键上可以区分为两类：%位双键型和8，:（##）异环双键型，紫外最大吸收波长分别为末端吸收和92953。其余结构中的变化为：（I）7位碳上有羟基、乙酰氧基或酮基取代及存在差向异构；（J）边链上的双键为92（9&）位双键或92（7#）位双键；（C）环上#6位及其边链上有无羟基或乙酰氧基取代。从以上结构分析中可以看出，只要具备紫外图谱和一定的质谱信息，就可以基本确定茯苓中三萜化学成分的结构。因此，本实验探讨了利用’)./@=>=@?,联用技术鉴定茯苓中三萜化学成分的方法。#"实验部分#;!"仪器与药材>)-7$$$三级四极杆串联质谱仪（美国应用生物系统公司）

5、，配有KLMJB-B5NOMIP源以及>5IGPNQ#;#数据处理系统；>R4GS5Q##$$高效液相色谱系统（美国安捷伦公司）；配有四元梯度泵，=>=紫外检测器，自动进样器。茯苓（!"#$%&"&"’（,CDE;）FBGH;）（北京同仁堂药店），经中国医学科学院药用植物研究所郭顺星教授鉴定。乙腈为色谱醇，水为二次蒸馏水，其它试剂为分析纯。#;#"色谱条件色谱柱：’()*+,-./#%柱（2;633T9&$33，&!3）；流动相：乙腈!水（（&$0&$）（$12%345）’（6&07&）（2%16%345）’（8&09&）（6%1:&345））（$;#<乙酸）；

6、柱温：9&U；流速：#;$3.@345。#;$"质谱条件"9$$7!$&!96收稿；9$$2!$9!#%接受本文系国家重点基础研究发展规划项目“:87”基金资助项目（AB;#:::$&22$#）万方数据第?期于能江等：高效液相色谱8二极管阵列检测8质谱法鉴定茯苓中的三萜成分BB#,?电喷雾离子化源，负离子检测（离子源喷射电压：!"#$$%；离子源温度为"$$&）；正离子检测（离子源喷射电压：’($$$%；离子源温度："$$&）。!)"#样品制备#茯苓粉末*$+，加甲醇,$-.，超声波提取/$-01，过滤；滤渣再加入甲醇,$-.超声波提取/$-01，过滤，合并滤液

7、，减压浓缩后，氮气吹干，得到干燥提取物$)*/(2+；提取物用少量甲醇溶解后，过34567894:.;8/$柱（<;"=;），根据薄层层析指示收集流份，浓缩干燥后，得到$)$22"+样品，准确称取/$)/-+，用甲醇定容至/-.，$)(>!-滤膜过滤后进样/$!.进行分析。$#结果与讨论$)%#&’()*+,+分析结果茯苓三萜的#位双键型和?，2（**）异环双键型的紫外最大吸收峰分别为末端吸收和/(/1-，因此，@A@紫外检测波长选用/*$1-和/(/1-，所得色谱图见图*。各色谱峰的紫外吸收特征见表*。图*B茯苓提取物的;C.<（检测波长：/(/1-（"）和/

8、*$1-（#））D0+)