聚酰胺uv法检测蜂花粉总黄酮的研究

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1、8试验研究报告中国蜂业APICULTUREOFCHINA2006年第57卷第8期[文章标号]0412-4367(2006)08-0008-03聚酸胺一VV法检测蜂花粉总黄酮的研究孙丽萍田文礼朱晓丽董捷’(中国农业科学院蜜蜂研究所，北京100093)摘要:黄酮类成分因其具有多样生物活性成为目前天然产物研究的热点。本实验探讨了聚酞胺-UV法作为蜂花粉总黄酮测定方法的可行性。结果表明以芦丁为标准品，以360nm为检测波长，用聚酞胺一LIV法检测蜂花粉总黄酮在0.005-0.025mg/mL范围内浓度与吸光度呈良好的线性关系，相关系数R2为0.9998，回收率、稳定性、精密

2、度和重现性均理想，其SD分别为2.48%(n=3),2.12%(n=3),0.49%(n=3),0.88%(n=5)。该法检测油菜蜂花粉中总黄amt含量为1.54%0关键词:蜂花粉总黄酮聚酞胺-UV法【中图分类号】S896.4[文献标识码」A目前，国内外对总黄酮的检测有若干种方法:HW.SY21-K电热恒温水浴锅(北京市长风仪器比色法(梁惠花，2003;魏永生，2005;田兴彩，仪表公司)KQ-50DB数控超声波清洗器(昆山市超2005)、胶束毛细管电泳法(PiettaP,1991;邓永智，声仪器有限公司)精密电子天平(梅特勒一托利多2003)、高效液相色谱法(Ha

3、slerA,1990;郑敏燕，仪器，上海有限公司)WF2UV-2100紫外可见分光2004)等，大量实验数据表明，对于蜂花粉中黄酮类光度计(尤尼柯上海仪器有限公司)化合物的含量，采用不同分析方法得到结果不同。，.3实验方法利用HPLC法进行检测必须具备所有被检测组1.3.1标准曲线的建立芦丁标准液:精密称取在分的标准品才能进行定性定量分析。比色法结果偏105℃干燥恒重的芦丁对照品5.Omg，用甲醇溶解，高，测定误差较大(魏永生，2004)，使得测定结果远摇匀，定容至l00mL，使之成为浓度为50}L岁ML的远高于蜂花粉总黄酮的实际含量。为克服底液强吸芦丁标准品溶液，

4、作为贮备液备用。收带来的干扰，研究人员对传统的比色法进行了改样品处理:精密称取样品Log，加乙醇定容至进，只有当测定条件严格一致的情况下，比色法所25mL，摇匀后，超声提取20min，放置。得结果才具有可比胜(魏永生，2004)0标准曲线的制作:精密吸取芦丁标准溶液聚酞胺一紫外分光光度法(出自《保健食品检(50Rg/mL):0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.OmL于lOmL比色验与评价技术规范》2003年版)是检测保健食品中管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm下测定吸黄酮类化合物的常用方法，具有操作简单，设备要光度，见表1。对所测得的数据采用直线回归法计

5、算求低，检测速度快，重现性好，灵敏度高等优点(蒋出标准曲线的回归方程，并以吸光度为横坐标，对娅萍，2003)，但在蜂花粉黄酮检测中未见应用。照品的浓度为纵坐标绘制标准曲线图，见图10本实验采用聚酞胺一UV法测定蜂花粉总黄酮，供试样品的测定方法:精密吸取处理后的样品考察了不同前处理方法对检测结果的影响，确立了上清液1.OmL，于蒸发皿中，加1g聚酞胺粉吸附，于一种适用于蜂花粉总黄酮的检测方法，为现行蜂花水浴上挥去乙醇，然后转人层析柱，先用20mL苯粉标准中所缺乏的功效指标的建立提供了有价值洗脱，弃苯，然后用25mL甲醇洗脱总黄酮，定容为的参考依据，具有实际应用价值。2

6、5mL。此液于360nm波长处测定吸光度。由吸光度，材料与方法值从标准曲线上查出样品溶液的浓度C，计算样品，.，样品与试剂中总黄酮的含量。油菜蜂花粉由中国农科院蜜蜂研究所提供，聚CxV,认xmx100(1)酞胺粉由巴陵石化有限责任公司提供，芦丁标准品由上海友思生物技术有限公司提供，NaNOZ,Al(NO3)3,式中:X一样品中总黄酮的含量，m吮NaOH、乙醇、甲醇、苯均为国产分析纯试剂。C一由标准曲线算得的被测液中黄酮量，R9，，2仪器设备M一取样量9V,一测定用样品体积，mL作者简介:孙丽萍，女，1963年生，副研究员主要从事蜂产品功能组分的分离提取，E-mail

7、:apis@vip.sina.com食通讯作者:蓝捷，女，1966年生.副研究员主要从事蜂产品研发，E-mail:jiedong@.caas.net.cn2006Vo1.57No.8中国蜂业APICULTUREOFCHINA试验研究报告9Vz样品定容总体积，mL表，聚酞胺一以法标准品溶液浓度与吸光度的关系1.3.2样品前处理分别用95%和75%的乙醇对，5pg/m10.138210LOOlg样品进行提取，定容至25mL，用上述三种方150.274八J0.422法进行检测，结果如图204200.557lj251.3.3稳定性实验精密称取1.飞样品，用75%乙0.6