荞麦蜂花粉中总黄酮提取工艺研究

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1、万方数据2009年7月第19卷第4期榆林学院学报JOURNAl。OFYUUNUNIVERSITYJuly．2009V01．19No．4荞麦蜂花粉中总黄酮提取工艺研究陈燕(咸阳师范学院化学与4Ex-学院，陕西咸阳712000)摘要：采用超声波技术和回流技术对荞麦蜂花粉中的总黄酮进行提取，以芦丁为提取指标，使用正交实验优化提取条件。超声提取最佳工艺是：物料比为15：l的无水乙醇，在频率为40KHz的超声波下处理140min；回流提取最佳工艺为选用15倍物料比的无水乙醇，80℃水浴回流70rain。实验结果表明提取荞麦蜂花粉中的总黄酮，采用回流提取法优于超声提取法。关键词：荞麦蜂花粉；总黄酮；提

2、取工艺中图分类号：TQ041+．7文献标识码：A文章编号：1008—3871(2009)04-0058一041引言荞麦又名三角麦、乌麦，是药食兼可的粮食作物，广泛分布于世乒各国。其花粉是一种珍贵的天然食品，不仅含有人体所需的多种营养成分[1】，且含有多种生理活性物质，具有增强人体免疫功能、延缓衰老、改善消化道功能、抗疲劳、抑制前列腺增生和治疗便秘等作用[2。】。人们对养麦种子中的黄酮类、植物甾醇类、荞麦碱、维生素、微量元素和蛋白质H“1研究的较多，但对于荞麦蜂花粉中的活性物质的研究较少。本实验将超声波提取应用于荞麦蜂花粉中总黄酮的提取，以芦丁为提取指标，与回流提取法进行比较，以期选择较好的

3、提取工艺，为养麦蜂花粉资源的综合开发利用提供科学依据。2实验部分2．1仪器和试剂UV一2450型紫外可见分光光度计(岛津公司)，KQ5200DB型数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；BS210S型电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)。芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供；乙醇，硝酸铝、亚硝酸、氢氧化钠均为分析醇级；荞麦蜂花粉由陕西老蜂农蜂业有限责任公司提供。2．2芦丁标准曲线的绘制准确称取19．5nag芦丁标样，用乙醇定容于50mL容量瓶中。分别取一系列上述芦丁标准溶液于25mL容量瓶中，加人0．7mL5％的NaN02溶液，5min后加入0．7mL10％的Al(N03)3溶液，摇匀

4、，6min后加入5mL4％的NaOH溶液，摇匀，用40％的乙醇溶液定容，10min后在波长510nnl处比色测定，以试剂为空白。对其结果用最小二乘法作线性回归，得芦丁浓度C(mol／L)与吸光度A的关系曲线的回归方程为：A=0．0272×104C+0．0506，r=0．9992，线性范围：7．68x10～～1．28×10～mol／L。2．3溶液显色反应的稳定性试验选取不同浓度的芦丁标准溶液，按上述过程加入显色剂，每隔10min测1次吸光度，结果表明，40rain内吸光度值基本元变化。2．4提取物总黄酮含量的测定准确称取一定量荞麦蜂花粉_按一定物料比加入溶剂浸润一超声处理(或者热处理)一补重

5、一过滤一取样测定。准确移取待测液lmL置于25mL容量瓶中，按2．2项中方法，于510nnl处测定吸光度，与标准曲线对照得到总黄酮浓度，提取率按下式计算：E％=丽in×100％其中：E％，表示提取率；nl为经换算后提取液中总黄酮的质量，g；M表示称取样品的质量，g。3结果与讨论3．1超声波提取花粉总黄酮最佳条件的确定3．1．1提取液浓度对提取的影响。准确称取养麦蜂收稿日期：2009～03．16基金项目：威Ⅳi师范学院专项科研基金资助项目(06XSYK275)作者简介：陈燕(1979一)，女．陕西宝鸡人，硕士，主要从事天然产物分析，E—nud：yanehenxy@126．coin万方数据陈燕

6、：荞麦蜂花粉中总黄酮提取工艺研究·59·花粉2．0g，分别加入10mL40％，60％，80％，100％乙醇，超声功率为24KHz，超声30rain，按2．4所述工艺流程测得提取液的吸光度，并绘制与乙醇浓度的关系曲线(见图1)。由图l可知，随着乙醇浓度的增加，醇溶性的黄酮类化合物溶解度增大，吸光度值增加，故选择100％乙醇进行提取。3．1．2物料比对提取的影响。以能浸没原料的最低乙醇用量为基础，其他条件不变，得到不同的物料比(提取液用量与样品质量之比，ml_／g)下花粉总黄酮的提取率(见图2)。结果表明，总黄酮的提取率随溶剂用量的增加先增加后降低，当物料比超过10：l后，提取率开始下降，故取

7、10倍原料用量的溶剂为较好。3．1．3超声时间对提取的影响。准确称取养麦蜂花粉2．0g，加入10倍原料用量的无水乙醇，在超声频率为24KHz的条件下，分别超声0．5，1．0，1．5，2．O。2．5h。按2．2所述过程显色测定，得到总黄酮吸光度与超声时间的关系曲线。根据图3所示花粉在超声处理2h时，提取量最大，随时间的延长提取量却逐渐降低。因此，在此条件下超声提取2h最佳。3．1．4超声功率对提取的影响．其他条件不变，样品