蒲公英中总黄酮提取工艺的研究

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1、蒲公英中总黄酮提取工艺的研究【摘要】目的对蒲公英中总黄酮的提取工艺进行优选。方法采用正交实验设计，以总黄酮的含量为指标，对提取溶剂、料液比、提取温度、提取时间4种因素进行研究。结果蒲公英细粉用甲醇，料液比1∶20，在70℃下超声提取10min，总黄酮的提取率较高。结论此工艺操作简便，重现性好,稳定可行。【关键词】蒲公英；总黄酮；提取工艺；正交实验　　蒲公英系菊科植物蒲公英TaraxacummongolicumHand-Mazz，碱地蒲公英TaraxacumsinicumKitag.或同属数种植物的干燥全草。蒲公英含有多种活性成分,如蒲公英甾醇、蒲公英苦素、黄酮类、咖啡酸、

2、绿原酸和多糖等。蒲公英总黄酮对宛式拟青霉菌和枯草杆菌具有良好的抑菌作用〔1〕，并具有重要的抗氧化作用，能有效清除超氧阴离子自由基。近些年来文献报道中对蒲公英总黄酮的提取及含量测定等研究甚少，本文以总黄酮的含量为考察指标，采用超声提取正交实验设计对蒲公英中总黄酮的提取工艺进行了研究，确定最佳提取工艺，以提高对黄酮类成分的有效利用率。　　1仪器与试剂日本岛津UV—2201型紫外—可见分光光度计；FF.H.l，精密量取3ml置25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，混匀，即得。表2L9(34)正交实验设计及结果分析（略）　　2.3对照品溶液的制备　　精密称取芦丁对照品10.90mg置

3、25ml容量瓶中，加5ml甲醇溶解，蒸馏水定容至刻度，即得0.218mg/ml的对照品溶液。　　2.4测定波长选择　　取芦丁对照品溶液3ml置25ml容量瓶中，加蒸馏水6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，放置6min；加10%三氯化铝溶液1ml，放置6min；再加氢氧化钠试液10ml，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，放置15min〔2〕，用紫外—可见分光光度计在200～700nm进行全波长扫描，最大吸收波长为510nm。表3方差分析（略）　　2.5线性关系考察　　精密吸取上述对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml，分别置25ml容量瓶中，依法在510

4、nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=8.8426X-0.0002，r2=0.9998,线性范围为0.008～0.053mg/ml。2.6样品测定分别取9份供试品溶液3ml于25ml容量瓶中，方法同“2.4”项，在510nm波长处测定吸光度计算总黄酮含量。结果见表2。　　由极差分析得知，影响因素的大小为B>A>C>D,即料液比为最主要的影响因素，溶剂次之，提取时间对结果影响较小。表3方差分析表明，提取溶剂、料液比对结果的影响具有极显著性意义，提取温度对实验结果有显著意义。正交设计实验结果显示提取工艺以A1B2

5、C3D2组合为最佳，但D因素影响最小，且3个水平差别不大，为节省能源，选用D1（超声10min）。即最佳工艺为20倍量甲醇，在70℃超声提取10min。　　2.7稳定性实验　　精密称取蒲公英粉末1g，依法测定。每隔10min测定1次，共测定7次。结果见表4。表4稳定性实验结果（略）　　结果显示,RSD=0.89%，表明样品在70min内稳定。　　2.8验证实验　　精密称取蒲公英粉末1g于具塞锥形瓶中，按最佳条件提取，依法进行测定，计算样品中总黄酮的含量。结果见表5。表5验证实验结果（略）　　结果显示：RSD=0.50%,表明此条件重复性良好。　　3结论与讨论蒲公英中总黄酮

6、的最佳提取工艺，以20倍量的甲醇为溶剂，在70℃下超声提取10min。样品中总黄酮的平均含量为53.48mg·g-1（RSD=0.50%）。　　黄酮类化合物的提取，文献报道大多为溶剂萃取法、碱提酸沉法、碳吸附法提取、超临界CO2流体萃取法，这些提取方法有的操作费时，有的仪器价格昂贵，不宜普及，本研究采用超声法提取，利用超声波产生的强烈振动，强烈的空化效应，较高的加速度和搅拌作用等，使蒲公英中黄酮类成分迅速溶出，大大缩短了提取时间，能耗低，提取效率高，且不破坏有效成分。该方法设备简单，操作简便，是一种较为理想的提取方法。【