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时间:2018-05-04
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1、知母总黄酮提取工艺的研究作者:闻永举,能力强,申秀丽【摘要】目的建立知母中总黄酮提取工艺,为知母总黄酮开发和利用提供依据。方法对提取方法、提取溶剂、提取时间进行研究,采用紫外分光光度法测定知母中总黄酮含量。结果知母中总黄酮较佳提取工艺为:70%乙醇超声提取30min。结论该方法简便、快速、准确,可作为知母中总黄酮提取及含量测定方法。【关键词】知母;紫外分光光度法;总黄酮;芒果苷Abstract:ObjectiveToestableamethodofextractiontechnologyoftotalfl
2、avonoidstoofferabasisforAnemarrhena'sdevelopment.MethodsItethod,solvent,timeofextractionofAnemarrhena'statolflavonoidsandinedtatolflavonoids'contentofAnemarrhenabyUV-spectrophotometry.ResultsItinby70%acohol.ConclusionThismethodple,quick,andaccurated,andsu
3、itabletoextractanddeterminetotalflavonoids'contentofAnemarrhena.Keyarrhena;UV-spectrophotometry;Totalflavonoids;Mangiferin知母为百合科植物知母AnemarrhenaasphodelloidesBge.的干燥根茎。中医理论认为,知母性寒,味苦、甘;入肺、肾、胃经;具有清热泻火、生津润燥功能。临床用于外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘[1]等症。研究表明知母中富含皂
4、苷、黄酮类化合物[2],其总黄酮又以芒果苷含量最高[3]。具有抗病原微生物、抗血小板聚集、降血糖、解热、抗炎、降低转氨酶等生理活性[4,5],芒果苷是其止咳的有效成分。对于知母的化学研究,2.4.2超声提取法取知母粗粉1g,精密称定,置100ml量瓶中,加甲醇至刻度,超声提取30min,放冷,用甲醇补足至刻度,摇匀,过滤,取续液5ml,置于50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。按“2.3项下分别取上述溶液”起,依法操作,测定各供试品溶液的吸收度。结果见表1。表1不同提取方法对知母总黄酮
5、含量的影响表1表明以上两种提取方法差别不大,回流提取法方法繁琐,耗时,能耗大;而且知母含有较多的黏液质,提取液较难过滤。而超声提取法的方法更方便、简单、快速,易于过滤。因此,选择超声提取法提取知母总黄酮。2.5提取溶剂的考察按照上述优选的方法,分别以甲醇和70%乙醇作为提取溶剂,提取知母总黄酮,并进行含量测定,(见表2)。表2表明甲醇、70%乙醇提取知母总黄酮差别不大,由于甲醇有毒,对环境有污染,选择70%乙醇作为知母总黄酮提取溶剂。表2不同溶剂对知母总黄酮含量的影响2.6提取时间的考察分别取知母粗粉1g
6、,精密称定,置于100ml量瓶中,加70%乙醇,稀释到刻度,分别超声20,30,40min,分别按“2.4.2项下放冷处理”起,依法操作,分别制备供试品溶液,并分别测定(见表3)。表3表明超声30min,知母总黄酮含量不再提高,因此,选择超声提取时间为30min。表3超声时间对知母总黄酮的影响时间t/min吸收度A202.0076302.1388402.1387n=32.7供试品溶液的制备按照上述优选的工艺参数制备供试品溶液,取知母粗粉1g,精密称定,置100ml圆底烧瓶中,加70%乙醇至刻度,超声提取3
7、0min,放冷,用70%乙醇补足至刻度,摇匀,滤过,取续液5ml,置于50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,即得供试品溶液。2.8精密度实验取“2.7”项下溶液,在258nm波长下,连续测定5次,其吸收度的RSD=0.09%,表明仪器精密度良好。2.9样品溶液稳定性考查取“2.7”项下溶液,每隔2h测定1次,测定5次,其吸收度的RSD=0.09%,表明溶液稳定性良好。2.10重现性实验取同一批的知母粉末5份,分别按“2.7”项下制备样品溶液,并按样品测定方法,测定5次,芒果苷含量9.57mg/g,RS
8、D=1.72%,表明样品重现性良好。2.11加样回收率实验取已知含量的供试品5份,分别精密加芒果苷一定量,依法制备供试品溶液,照含量测定法测定,加样回收率为101.01%,相对标准偏差1.27%。结果见表4。表4芒果苷回收率实验2.12样品的测定按上述方法,对3个不同产地知母药材进行了总黄酮的含量测定。结果见表5。表5不同知母总黄酮的含量测定从表2可以看出,不同的产地知母总黄酮含量有较大的差异,其功效也必然有一定的差别,河北知
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