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1、维普资讯http://www.cqvip.com农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2003,11(1):89-93·研究论文·稻瘟病菌突变菌株的分子鉴定术何月秋1,2HeiLEUNGRobertS.ZEIGLER唐文华(1.云南农业大学植物保护学院,昆明650201;2.国际水稻研究所昆虫与植病系,菲律宾马卡提市3127;3.中国农业大学植物保护学院,北京100094)摘要:利用Rep—PCR的两对引物Pot2·1/Pot2—2和PMC1-2/PMC1-3、177条RAPD引物和MGR586为探针的3种RFLP分子技术对温室的9个和自
2、然病圃上的5个致病性突变菌株进行分析3种技术鉴定了温室9个菌株与其起始菌株的DNA指纹基本一致,检测到7个菌株DNA条带缺失1-3条,2个菌株没有变化;分析了病圃上的侵染携带抗病基因,和2的5个突变株的起源,依据DNA指纹和致病类型证明后者起源于具有无毒基因Avr一1的菌株,排除了外来菌株的漂移作用.证实了突变是稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)进化的主要动力。关键词:稻瘟病菌;突变菌株;分子鉴定MolecularIdentificationoftheMutantIsolatesofMagnaporthegriseaHeYueqiu。HeiLEUNG。RobertS.ZE
3、IGLER。TangWenhua(1.PlantProtectionCollege,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201;2.Entomology&PlantPathologyDivision,InternationalRiceResearchInstitute,Makati3127,Philippines3.PlantProtectionCollege,ChinaAculturalUniversity,Beijing100094,China)Ab—m陡Pathogenicmutantisolates9fromthegreenhouse
4、and5fromtheInternationalRiceResearchInstituteBlastNursery.respectively,wereidentifiedbyusingmoleculartechniqueswithRep—PCRofthetwoprimerpain,Pot2—1/Pot2—2andPMC1-2/PMC1—3,RAPDof177primersandRFLPofMOR586.Theresultsindicatedthatthe9mutantsfromgreenhousehadalmostidenticalDNAbandpauemsandtheirorigi
5、nalisolateslost1~3bandsfor7mutants,butnochangesfortheother2mutants.The5mutantsfromthenursery.whichdefeatedresistancegenesPi—landP一2.originatedfromtheisolateswithavirulencegeneAvr-1inthefield,notfromoutsidebygeneticshiftbasedontheirpathotypesandDNAbandpa~ems.Therefore,itwasconcludedthatthemutati
6、onwasamainevolutionforceforMagnaportheg~isea.K。y:Magnaporthegrisea;mutantisolate;molecularidentification水稻稻瘟病菌的致病性稳定与否,历来是植物1材料和方法病理学界争论的一个重要话题口I2],但稻瘟病菌是一个遗传背景极其复杂的群体的看法得到了分子生物1.1菌株技术的证实。Hamer等p展了MGR586探针,已被供试的稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)菌株来自国内外植病工作者广泛应用于水稻稻瘟病病菌两部分。第一部分来自温室人工反复接种和分离的群体结构、水稻病菌与杂草病菌间
7、亲源关系分析然12个菌株,其中3个为起始菌株,9个为突变菌株而,还没有关于稻瘟病菌的致病性突变菌株的DNA;第二部分315个菌株来自国际水稻研究所稻瘟畸变的详细报道。本研究试图利用分子生物学技术病圃圄从病菌的基因组上解析病菌的变异情况,跟踪病菌1.2DNA的提取变异方向,为水稻抗病育种提供理论依据。见文献【9】。基金项目:国际水稻研究所的生物多样性持续控制水稻病虫害项目。何月秋:男,1956年生,博士,教授。E-mail:
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