农杆菌介导的稻瘟病菌致病突变菌株的筛选

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1、植物病理学报ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA39(2)：160—167(2009)农杆菌介导的稻瘟病菌致病突变菌株的筛选周惠萍，吴毅歆，过元人，久保康．，何月秋(云南农业大学教育部生物多样性与病虫害控制重点实验室，昆明650201；日本京都府立大学农学部植物病理实验室，京都60643522)摘要：利用1个致病能力非常弱的稻瘟病菌菌株CY2和农杆菌介导T—DNA方法，已成功地获得了5000多个转化子，并以多个转化子混合接种含25个不同抗病基因的近等基因系，获得了30个致病突变体。但突变体针对不同的无毒基因有很大差别，从含有Pi—ta的F128—1上获得了

2、14个突变体，从含有Pi—a的IRBL-2上获得了7个突变体，从含有P一S的IRBL-4上获得了2个突变体，而从其它抗病基因的品系上未发现任何突变体，故T—DNA似乎有插入热点。不同突变体在携带相同抗病基因的品系上的致病性存在很大差异，表明这些近等基因系可能还携带其它抗稻瘟病基因。CY2不能侵染普遍认为不含抗稻瘟病基因的丽江新团黑谷(LTH)，而7个突变体则能成功地使其发病，表明LTH亦含有抗稻瘟病基因。关键词：稻瘟病菌；农杆菌介导的遗传转化；转化子；致病突变体ScreeningofAgrobacteriumtumefaciens--mediatedpathogenicm

3、utantsofMagna·-porthegriseaZHOUHui—ping，WUYi—xin，GentoTSU儿，YasuyukiKUBO，HEYue．qiu(KeyLaboratoryofAgriculturalBiodiversityandPestsControl，MinistryofEducation，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China；LaboratoryofPlantPathology，FacultyofAgriculture，KyotoPrefecturalUniversity，Kyoto606

4、43522，Japan)Abstract：ByusingAgrobacteriumtumefaciens—mediatedtransformation，morethan5000transformantswereobtainedfromMagnaporthegriseaCY2，anisolatewithveryweaklypathogenictorice．Among30pathogenicmutantswerescreenedbyinoculationwithmixedsporesuspensionof20-30transformantsontothenear--iso—-

5、geniclines(NIL)contained25riceblastresistancegenes．Mutationhadquitedifferentfrequencyatdifferentpathogenicity-relatedlociforthepathogen．Noanymutantswerefoundfromlineswiththeotherresistancegeneswhileasmanyas14，7and2mutantswerefoundfromthelineF128·1carryingPi—ta，thelineIRBL一2carryingPi-aand

6、thelineIRBL-4carryingPik—．respectively．ItwasindicatingthatT—DNAmighthavein—serthotspotinthepathogen．ThemutantsshoweddifferentpathogenictypesontheNILswiththesameblastresistancegeneanditimpliedthattheNILsmightcarryotherresistancegenes．LTH，alinewithoutanyblastresistancegenesconsideredcommonl

7、y，mighthaveresistancegenesdependingonthefactthat7mutantswereharvestedfromitandcouldnotinfectedwiththewildtypeCY2．Keywords：Magnaporthegrisea；Agrobacteriumtumefaciens—mediatedtransformation；transformant；pathogenicmutant中图分类号：$435．111．41文献标识码：A文章编号：0412-0914(2009)02-01