根癌农杆菌介导的稻瘟病菌近等菌系的构建与初步应用

《根癌农杆菌介导的稻瘟病菌近等菌系的构建与初步应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第25卷第5期云南农业大学学报Vo1．25No．52010年9月JournalofYunnanAgriculturalUniversitySept．2010根癌农杆菌介导的稻瘟病菌近等菌系的构建与初步应用木何余勇，周惠萍，吴兴兴，吴毅歆，王志远，毛自朝，何月秋(1．云南农业大学，农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室，云南昆明650201；2．云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明650201)摘要：利用根癌农杆菌C58C1介导转化1株致病力极弱的野生型稻瘟病菌菌株CY2，成功地获得3000多个转化子，混合接种于携带25个不同抗病单基因的水稻近等基因系上

2、，获得4株单胞致病突变体；继代培养和PCR检测表明，这些突变体均为T—DNA插入CY2的后代，而非自发突变或外源菌株污染。将4株突变体与实验室已保存的20株致病突变体分别回接水稻近等基因系，推断其携带的致病基因类型，结果表明突变体分别针对13个抗性单基因的18个单基因系发生了突变，其中针对Pi—U，Pik—s，Pi—sh单基因系表现出较高的侵染频率。由于这些突变体均来自同一个菌株，仅致病性存在差异，属于近等菌系，利用其分析出102个水稻品种中的34个品种的抗病基因组成，其中，抗病基因Pik—s，Pi—a，Pi—sh，Pi一19(t)分布频率较高，分别达70．5

3、9％，61．76％，52．94％和44．12％，且带有这类基因的糯稻品种多于杂交水稻。关键词：稻瘟病菌；近等菌系；根癌农杆菌；T—DNA转化；抗病：基因鉴定中图分类号：S435．111．41文献标识码：A文章编号：1004—390X(2010)05—0603—08Agrobacteriumtumefaciens-MediatedConstructionandPreliminaryApplicationofNear-isogenicIsolatesofMagnaportheoryzaeHEYu—yong，ZHOUHui—ping，WUXing—xing，WUYi

4、—xin，’WANGZhi—yuan，MAOZi—chao．HEYue—qiu’(1．LaboratoryofAgriculturalBiodiversityandPestsControl，MinistryofEducation，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China；2．CollegeofAgricultureandBiotechnology，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China)Abstract：MagnaportheoryzaeCY2wi

5、thweakpathogenicitytoricewastransformedbyAgrobacteriumtumefaciensC58C1mediation，andmorethan3000transformantswereobtained，then4pathogenicmutantswerescreenedoutamongthembyinoculatingontothericenear—isogeniclineswith25differentresistancegenes．Theresultsofsecondaryculturesonthemediumwit

6、hhygromycinBandPCRamplifi．cationindicatedthemutantswereCY2’StransformantsbytheinsertionofT—DNAbutnotcontamina—tedisolates．Then，4pathogenicmutantsplusother20pathogenicmutantsinthelaboratorywereinoc．ulatedbackontothericenear—isogeniclinestoinvestigatetheirdifferentvirulencegenes，showi

7、ngthosemutantswerepathogenictoricelineswith13differentresistancegenes，especiallytotherice收稿日期：2010—04—06修回日期：2010—05—17基金项目：国家行业计划(200803008)；国家“863”计划项目(2002AA245041)；农业部“948”项目(2006一G61)；国家行业计划项目(200803008)。作者简介：何余勇(1983一)，男，四川广安人，硕士研究生，主要从事植物病害控制及抗病基因研究；周惠萍对本文做了同等贡献。通讯作者Correspon

8、dingauthor：何月秋(1956